بررسي كاريولوژيك گونه اهلي بز(كاپرا هيركوس) به منظور تعيين كاريوتايپ بز نژاد رائيني با الگوي نواربندي G

Karyological Study of Domestic Goat (Capra Hircus) to determine of G-banded karyotype of Raeini goat

دراين تحقيق 45 راس ازبزهاي نژاد رائيني مورد آزمايش قرارگرفتند. باسرنگ استريل، 0/4 ميلي‌ليترخون از وريدوداج دام هاي مورد آزمايش به 5 ميلي ليترمحيط كشت RPMI1640 انتقال داده وبه مدت72 ساعت درانكوباتور كشت داده شدند. دراين بررسي كشت بافت كامل محيط خون انجام گرفت. لنفوسيت‌هاي T توسط فيتوهم آگلوتينين نوع M وادار به تقسيم شده و در ساعت 70 با 200 ميكروليتركلشي‌سين درمرحله متافازميتوز متوقف گرديدند. براي تهيه لام نمونه‌هاتحت تيمارمحلول هيپوتونيك كلريدپتاسيم قرارگرفته، سپس بامحلول فيكساتيوكارنوي تثبيت گرديدند. از سوسپانسيون سلولي بر روي لام گسترش كروموزومي تهيه گرديد. براي نواربندي، لام ها 48 ساعت در آون 60-56 درجه سلسيوس قرارگرفته و با آنزيم پروتئوليتيك تريپسين موردهضم آنزيمي قرارگرفته و با محلول رنگ گيمس ارنگ آميزي شدند. سپس با ميكروسكوپ متصل به رايانه مورد بررسي قرارگرفته و از گسترش هاي كروموزومي عكس تهيه گرديد. بزنژادرائيني داراي عدد كروموزومي 60=n2 مي باشد. تمام كرووزوم‌هاي بزهاي مورد مطالعه ازنوع آكروسنتريك اند. در اين روش سانترومرها رنگ نگرفتند و ناحيه سانترومري بصورت تيغه صاف از انتهاي ديگركروموزوم قابل شناسائي است و با يك نوارتيره مشاهده مي شود. هيچ‌گونه ناهنجاري ساختاري وعددي در كاريوتايپ دام ها مشاهده نگرديد. كاريوتايپ بزها در دوجنس نر و ماده و با توجه به شاخص سانترومري آن ها تنظيم گرديده است.

In order to prepare the karyotype of Raiini Goats from blood lymphocytes ,peripheral blood of 40Animals (20 male and 20 female) were taken from each breed and every genuse using heparinized Syring .Then ,all of the samples was transfered to laboratory and treat them in cool circumstance in 4degree of centigrade in refrigerator. After from each sample 0.5 ml of whole blood was cultured in RPMI1640 medium culture and incubated at 37ºC for 72 hours. The resulting (PHA-M) was used as mitogenic agent. After 72 hours 200µl cholchicine was added to each samples in order to stop the cell division and mitose cycle in metaphase stage. Then, they treated with hypotonic solution. Proliferated lymphocytes were spread and treated with trypsin enzyme, subsequently stained by G-banding method. All samples has monitored under microscope and pictures was sent to computer. The results showed that all goats have a diploid chromosome number of 2n=60. Each karyotype consisted of 29 pairs of acrocentric autosomes. The largest acrocentric chromosome was X and the smallest chromosome was Y.