شناسايي جهش فقدان عملكرد p.R12X در جايگاه ژني SLC37A2 در گاوهاي مونبليارد و هلشتاين

هدف از پژوهش حاضر شناسايي جهش فقدان عملكرد p.R12X مؤثر بر مشكلات توليد مثلي و سقط جنين در ژن SLC37A2 با روش هاي PCRSSCP و توالي يابي در گاوهاي هلشتاين و مونبليارد بوده است. تعداد 250 نمونه خون (150 نمونه هلشتاين و 100 نمونه مونبليارد) تهيه و استخراج DNA با كيت انجام شد. يك جفت آغازگر اختصاصي با نرم افزارOligo7 طراحي شد كه قطعه اي با طول 208 جفت باز از اگزون 2 ژن SLC37A2 حاوي جهش p.R12X را تكثير نمايد. تعيين ژنوتيپ نمونه ها با روش SSCP انجام و فراواني هاي ژني و ژنوتيپي و شاخصه هاي ژنتيك جمعيت با نرم افزارPOPGEN محاسبه شدند. در جايگاه SLC37A2 دو ژنوتيپ AA و AB به ترتيب با فراواني هاي 98.7 و 1.3 و 86 و 14 درصد به ترتيب در دو نژاد هلشتاين و مونبليارد مشاهده شدند. همچنين فراواني هاي آللي ژن SLC37A2 در دو جمعيت هلشتاين و مونبليارد براي آلل هاي A و B به ترتيب برابر با 99.3 و 0.7 و 0.93 و 0.7 برآورد شدند. تست دقيق فيشر و تست كاياسكوئر نشان داد كه اختلاف آماري معني داري از نظر فراواني هاي آللي و ژنوتيپي بين دو جمعيت هلشتاين و مونبليارد وجود دارد (0.05 p ). پس از تعيين ژنوتيپ، از هر ژنوتيپ دو نمونه به طور دو طرفه توالي يابي شدند و بررسي هاي بيوانفورماتيكي توالي هاي حاصل با نرم افزار BioEdit انجام شد. نتايج نشان داد كه در ژنوتيپ AB ژن SLC37A2 در گاوهاي هلشتاين و مونبليارد جهش فقدان عملكرد (p.R12X) وجود دارد. با توجه به نقش جهش p.R12X در نقايص توليد مثلي و سقط جنين در گاو مونبليارد مي توان از نتايج اين پژوهش مستقيما در برنامه هاي اصلاح نژادي جهت شناسايي دام هاي حامل و حذف آن ها در گله هاي تجاري و روستايي استفاده نمود.