شناسايي مولكولي آناپلاسما فاگوسيتوفيلوم (Anaplasma phagocytophilum) در گاوها و گوسفندان استان گيلان

Molecular identification of Anaplasma phagocytophilum in cattle and sheep of Gilan province

گونه آناپلاسما فاگوسيتوفيلوم يكياز باكتري‌هاي بيماري­زاي نوپديد منتقله توسط كنه‌ها مي‌باشد كه باعث ايجاد بيماري مشترك بين انسان و بسياري از حيوانات مي‌گردد و به همين دليل اهميت آن در بهداشت عمومي جامعه قابل‌توجه مي‌باشد. هدف از انجام مطالعه حاضر، شناسايي مولكولي گونه آناپلاسما فاگوسيتوفيلوم در گاوها و گوسفندان استان گيلان بود. بدين منظور در طول سال 1397، تعداد 200 نمونه خون از طريق رگ وداج گاوها و 200 نمونه خون از طريق رگ وداج گوسفندان، به‌طور تصادفي از نقاط مختلف استان گيلان جمع‌آوري گرديد. جهت آزمايش ­PCR (polymerase chain reaction)، در ابتدا DNA استخراجي از نمونه‌هاي خوني، با جفت آغازگري كه قطعه 1468 جفت بازي از ژن 16S­rRNA جنس آناپلاسما را تكثير مي‌كند، تكثير داده­شد. 70 نمونه‌ مثبت اوليه گاوي با استفاده از روش nested-PCR از نظر وجود گونه آناپلاسما فاگوسيتوفيلوم بررسي شدند و در نتيجه 66 نمونه (33 درصد)، مثبت تشخيص داده شد. همچنين 38 نمونه مثبت اوليه گوسفندي با استفاده از روش nested-PCR، ازنظر وجود گونه آناپلاسما فاگوسيتوفيلوم بررسي شدند كه 10 نمونه (5 درصد)، از اين نظرمثبت تشخيص داده شدند. تحليل مقايس ه­اي درصد فراواني آلودگي به آناپلاسما­فاگوسيتوفيلوم گاوها و گوسفندان مورد آزمايش، در ارتباط با فصول مختلف سال، سنين مختلف، جنسيت دام، ارتفاع از سطح دريا، ناقلين و نوع دامداري (نيمه‌صنعتي- سنتي) هم نشان داد كه فقط فراواني گونه آناپلاسما فاگوسيتوفيلوم در گوسفندان استان گيلان، بين دو نيمه اول و دوم سال داراي اختلاف آماري معني‌دار بود (05/0 p < /em><). نتايج مطالعه نشان داد كه آناپلاسما فاگوسيتوفيلوم از گونه ­هاي رايج آناپلاسما در بين دام­هاي استان گيلان مي­باشد. با توجه به نقش آناپلاسما فاگوسيتوفيلوم در بروز آناپلاسموزيس گرانولوسيتيك در انسان، اين موضوع به لحاظ بهداشت عمومي حائز اهميت مي­باشد.

Anaplasma phagocytophilum is one of the emerging pathogenic bacteria transmitted by mites, which causes zoonotic disease, between humans and many animals. Hence, its importance in public health is significant. The aim of this study was molecular identification of Anaplasma phagocytophilum in cattle and sheep of Gilan province. For this purpose, during 2018, 200 blood samples of cattle, and 200 blood samples from sheep were collected randomly via the jugular vein from different parts of Gilan province. The extracted DNA from blood cells were amplified by Anaplasma-all primers, which amplify an approximately 1468bp DNA fragment from region of 16S rRNA gene from various members of the genus Anaplasma. All 70 bovine positive specimens wereanalyzed for the presence of A. phagocytophilum with proprietary nested-PCRand 66 of blood samples (33%) were positive for A. phagocytophilum. In addition, 38 sheeppositive samples with proprietary nested-PCR wereanalysed for the presence of A.phagocytophilum and 10 of sheep blood samples (5%) were positive for A. phagocytophilum. The chi-squaretest was used to compare the percentage of A.phagocytophilum contamination of cattle and sheep in association with different seasons, different ages, animal gender, sea level, carriers and type of animal husbandry (semi-industrial-traditional). The results of this comparison indicated that only the abundance of A. phagocytophilum in sheep of Gilan province had a significant difference between the first and second half of the year (p < /em><0.05). The results of this study showed that A.phagocytophilum is a common species of Anaplasma in livestock of Gilan province. Given the role of this species in the occurrence of granulocytic anaplasmosis in humans, this issue is important in terms of public health.