مطالعۀ فنوتيپي و ژنوتيپي كلاس‌هاي ژن تنظيم‌گر مقاومت به كوليستين (arn) در اسينتوباكتر بوماني جداشده از موارد باليني به روش PCR چندگانه

A Phenotypic and Genotypic Study of Colistin arn Resistance Regulator Gene Classes in Acinetobacter Baumannii isolated from Clinical Cases using Multiplex PCR

مقدمه: كوليستين آخرين خط درمان در عفونت‌هاي بيمارستاني ناشي از اسينتوباكتر بوماني به شمار مي‌آيد. امروزه با روشن‌شدن سازوكار انتقال مقاومت از طريق ژن‌هاي arn، بروز الگوي مقاومت دارويي جديد در جدايه‌هاي اسينتوباكتر بوماني مشاهده شده است. در مطالعۀ حاضر سعي شد به بررسي فنوتيپي و ژنوتيپي كلاس‌هاي ژن تنظيم‌گر مقاومت به كوليستين (arn) در گونه‌هاي جدا‌شده از موارد باليني پرداخته شود. مواد و روشها: به‌منظور انجام اين مطالعۀ توصيفي، پس‌از دريافت رضايت كتبي، تعداد 400 نمونۀ باليني از بيماران بستري در بيمارستان حضرت رسول تهران جمع‌آوري شد. پس‌از شناسايي جدايه‌ها با استفاده از روش‌هاي بيوشيميايي و بررسي 16S rDNA، الگوي مقاومت آنتيبيوتيكي جدايه‌ها به دو روش انتشار ديسك و روش مولكولي (براي رديابي ژنهاي arnBوarnT) تعيين شد. نتايج: تعداد 60 سويۀ اسينتوباكتر بوماني از 400 نمونۀ گرفته‌شده جدا شد. مطابق نتايج بررسي الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي، در بيشترين حالت، بيش از 38 درصد نمونه‌هاي خون داراي گونۀ اسينتوباكتر بوماني بودند و در هيچ نمونۀ مغزي‌نخاعي، اسينتوباكتر بوماني يافت نشد و كمترين نسبت آلودگي را نشان داد (p <0.05)؛ همچنين اختلاف آماري معناداري بين حساسيت آنتي‌بيوتيكي جدايه‌هاي اسينتوباكتر بوماني به كوليستين و ساير آنتي‌بيوتيك‌ها مشاهده شد (p <0.05)؛ علاوه‌بر‌اين، سويه‌هاي مقاوم به كوليستين داراي ژن‌هاي arnB و arnT بودند كه در مقايسه با ساير سويه‌ها ازنظر آماري معنادار بود (p <0.05). بحث و نتيجهگيري: باتوجه‌به اينكه كوليستين آخرين خط درمان است، افزايش مقاومت به آن مي‌تواند به افزايش مرگ‌و‌مير و هزينه‌هاي بيمارستاني منجر شود؛ از‌اين‌رو، به‌كارگيري رژيم‌هاي درماني جديد و حساسيت بيشتر در تشخيص به‌موقع و كنترل عفونت‌هاي بيمارستاني امري ضروري به نظر مي‌رسد.

Introduction: Colistin is considered as the last line of treatment in nosocomial infections caused by Acinetobacter baumannii. Nowadays, with the elucidation of resistance transition mechanisms through arn genes, a new drug resistance pattern has been observed in Acinetobacter baumannii isolates. The aim of this study was to investigate the phenotypic and genotypic roles of the genes for regulating resistance to Colistin (arn) in strains isolated from clinical cases. Materials and methods: To conduct this descriptive study, after obtaining the written consent, 400 clinical samples were collected from patients admitted to Hazrat-e-Rasoul Hospital in Tehran. After the identification of the isolates using biochemical methods and 16srDNA analysis, the antibiotic resistance pattern of the isolates was determined by disk diffusion and molecular methods (to detect arnT, arnB genes). Results: Sixty Acinetobacter baumannii strains were isolated from 400 samples. The results of antibiotic resistance analysis showed that, in most cases, more than 38% of blood samples had Acinetobacter species. Also, no Acinetobacter was found in any of the spinal cord specimens, which showed the lowest infection rate (p <0.05). There was also a significant difference between the antibiotic susceptibility of Acinetobacter baumannii isolates to Colistin and other antibiotics (p <0.05). In addition, Colistin resistant strains had arnB and arnT genes, which were considered statistically significant (p <0.05) compared to other strains. Discussion and conclusion: Since Colistin is used as the last line of treatment, increased resistance to it can lead to increased mortality and hospital costs. Therefore, the application of new therapeutic regimens and greater sensitivity to the timely diagnosis and control of nosocomial infections seems necessary.