بررسي حضور ژن بتالاكتامازي TEM از باكتري سودوموناس آئروژينوزا در زخم هاي سوختگي و اثر ايمي پنم بر بيان اين ژن با روش Real-time PCR

Isolation of TEM beta-lactamase gene in Pseudomonas aeruginosa and Imipenem Effect on Expression of TEM Gene by Real-Time PCR from Burn Wound Samples

سويه هاي هاي سودوموناس ايروژينوزاي، مقاوم نسبت به بيشتر آنتي بيوتيك هاي رايج، مشكلاتي در درمان اين عفونت ها ايجاد مي كنند. ايمي پنم، انتي بيوتيك با پتانسيل بالا، براي از بين بردن سويه هاي مقاوم به آنتي بيوتيك، اين باكتري مي باشد. هدف از انجام اين مطالعه بررسي اثر ايمي پنم، در بيان ژن بتالاكتامازي TEM، در سويه هاي سودوموناس آيروژينوزاي مقاوم به انتي بيوتيك، از نمونه هاي زخم سوختگي، با روش Real-time PCR بود. روش ها در مطالعه توصيفي، 100 نمونه، از زخم هاي سوختگي، در بيمارستان هاي تهران، جمع آوري شد. ايزوله هاي سودوموناس آيروژينوزا از نمونه ها شناسايي شد. پس از استخراج DNA ، ژن TEM ، با انجام واكنش PCR، از نمونه هاي داراي اين باكتري، جداسازي شد و ميزان MIC نسبت به ايمي پنم، براي ان ها تعيين شد. سپس، بيان ژن بتالاكتامازي TEM ، در سويه هاي سودوموناس آيروژينوزا تيمار شده و سويه هاي بدون تيمار با ايمي پنم، با روش Real-time PCR مقايسه شد. نتايج در 100 نمونه زخم، 60 ايزوله (60%) داراي عفونت با باكتري سودوموناس آيروژينوزا بودند و در 34 نمونه (56/6 %) از سودوموناس آيروژينوزا هاي ايزوله شده، ژن بتالاكتاماز TEM حضور داشت. بيان ژن TEM، در سويه هاي سودوموناس آيروژينوزاي تيمار شده با ايمي پنم در مقايسه با سويه هاي غيرتيمار شده، ، به ميزان 78/68٪ كاهش داشت. نتيجه گيري بر اساس نتايج اين تحقيق، مي توان از ايمي پنم با فعاليت ضد بتالاكتامازي، كه موثر بر كاهش بيان ژن TEM بود، در كنترل سويه هاي سودوموناس آيروژينوزاي مقاوم به آنتي بيوتيك، استفاده نمود.

Pseudomonas aeruginosa strains that were resistance to majority of commonly used antibiotics were caused problem in treatment of these infections. Imipenem is the excessive potential antibiotic for elimination of antibiotic resistance isolates of these bacteria. Aim of this study was, identification of imipenem effect on TEM beta-lactamase gene expression in resistant to antibiotic, Pseudomonas aeruginosa strains, from burn wound samples, by Real-time PCR. Methods In descriptive cross-sectional study, 100 burn wound samples were collected from Tehran hospitals. Pseudomonas aeruginosa isolates, were found from samples. After DNA extraction by PCR reaction, were isolated TEM gene from samples contained this bacteria, and were defined imipenem MIC measure, for them. Then, were compared, TEM beta-lactamase gene expression, among imipenem-treated and untreated Pseudomonas aeruginosa strains, by Real-time PCR Results From 100 wound samples, 60 isolates (60%) were infected by Pseudomonas aeruginosa and in 34 samples (56.6%) of Pseudomonas aeruginosa isolated, were presence TEM beta-lactamase gene. Expression of TEM gene, 78.68% decreased in imipenem-treated Pseudomonas aeruginosa strains, compare by untreated strains. Conclusion According of this study finding, from imipenem by anti-beta-lactamase action that was interested on reduction of TEM gene expression, could be used in control of antibiotic resistance Pseudomonas aeruginosa strains.