طراحي واكنش زنجيره اي پلي مراز جهت تشخيص مولكولي باكتري هاي عامل اصلي پريودنتايتيس

Designing Polymerase Chain Reaction for Molecular Diagnostics of the Primary Bacterial Cause of Periodontitis

زمينه و هدف بيماري پريودنتال باعث بيماري التهابي در دهان و دندان مي‌شود كه ممكن به‌صورت حاد يا مزمن به بخش‌هاي بافت‌هاي نرم و سخت دندان آسيب برساند. هدف از اين مطالعه طراحي تكنيك PCR براي تشخيص اين عوامل است. مواد و روش‌ها: طراحي پرايمرهاي اختصاصي براي هر يك از اين عوامل باكتريايي Aggregatibacter actinomycetemcomitans، Porphyromonas gingivalis، Prevotella intermedia، Tannerella forsythensis و Treponema denticola انجام گرديد. سپس براي هر باكتري پس از كلون كردن تست‌هاي حساسيت و اختصاصيت گذاشته شد. نتايج بر اساس پرايمرهاي اختصاصي براي باكتري‌هاي ژن hbpA Aggregatibacter actinomycetemcomitans، ژن fimA Porphyromonas gingivalis، ژن 16s rRNA باكتري Prevotella intermedia 16s rRNA Tannerella forsythensis و ژن 16s rRNA Treponema denticola به ترتيب باندهاي 161bp، 162bp، 283 bp، 250 bp و 173 bp بر روي ژل ديده شد و پس از كلونينيگ، تست‌هاي حساسيت و اختصاصيت انجام گرفت. نتيجه‌گيري: جهت بررسي و تشخيص بيماري‌هاي پريودنتال با استفاده از تكنيك PCR، مي‌توان با اختصاصيت و حساسيت بالا اين عوامل را شناسايي كرد.

Background & Objective: Periodontal disease, which can become a chronic condition, is an inflammatory disease that upsets the soft and hard structures supporting the teeth. The aim of the present study was to design and develop an in-house PCR Method, to detect putative periodontitisrelated bacterial pathogens. Materials & Methods: The PCR method was launched using specific primers of the five bacteria including Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia, Tannerella forsythia, Porphyromonas gingivalis and Treponema denticola. Then, the sensitivity and specificity tests were performed for each bacterium after cloning. Results: Basic specific Primer: hbp Aggregatibacter actinomycetemcomitans ، fimA Porphyromonas gingivalis ، gene 16s rRNA Prevotella intermedia 16s rRNA Tannerella forsythensis gene and 16s rRNA Treponema denticola 161 bp ، 162 bp, 282 bp, 280 bp,173 bp and the sensitivity and specificity tests were performed for this gene. Conclusion: In order to evaluate and diagnose periodontal diseases using PCR technique, these factors can be identified with high specificity and sensitivity.