تاثير عصاره آبي گياه مرزنجوش بر رده ي سلولي لوسمي پروميلوسيت حاد (HL-60)

Effect of aqueous extract of Origanum vulgare on acute promyelocytic leukemia cell line (HL-60

لوسمي پروميلوسيت حاد (AML-M3) از بدخيمي هاي سلول هاي ميلوييدي است كه با مقاومت به آپوپتوز و توقف تمايز در سلول هاي پروميلوسيت در مغز استخوان همراه است. هدف از اين مطالعه بررسي تاثير عصاره آبي مرزنجوش بر القاي آپوپتوز در رده ي سلولي لوسمي پروميلوسيت حاد (HL-60) بود. مواد و روش ها قدرت بقاي سلول هاي HL-60تحت تيمار با غلظت هاي مختلف عصاره مرزنجوش با استفاده از تست سميت سلولي مورد بررسي قرار گرفت و مقادير IC50 در زمان هاي 24، 48 و 72 ساعت براي اين سلول ها تعيين گرديد. بيان ژن هاي Caspase8، Caspase9، Bax، Bcl-2 و Nrf2 با تست Real Time PCR سنجيده شده و مراحل آپوپتوز اوليه، آپوپتوز ثانويه و نكروز در سلول هاي HL-60 در اثر تيمار با عصاره مرزنجوش با استفاده از رنگ آميزي آكريدين اورنج/ اتيديوم برومايد مورد بررسي قرار گرفت. در نهايت داده ها با استفاده از نرم افزار SPSS و آزمون آماري آناليز واريانس يك طرفه تجزيه و تحليل شدند. يافته ها نتايج نشان داد، عصاره مرزنجوش باعث كاهش قدرت بقا در سلول هاي HL-60 شده و بيان ژن هاي Caspase9، Caspase9، Bax، Bcl-2 و Nrf2 در اثر تيمار با يك پنجم از IC50 72 ساعت عصاره مرزنجوش دچار تغيير شده است. همچنين تغييرات ريخت شناسي هسته حاكي از القاي آپوپتوز در سلول هاي HL-60 مي باشد. نتيجه گيري به نظر مي رسد عصاره آبي برگ گياه مرزنجوش مي تواند موجب القاي آپوپتوز در رده ي سلولي لوسمي پروميلوسيتيك حاد (HL-60) تحت شرايط آزمايشگاهي شود.

Acute promyelocytic leukemia is a malignancy of myeloid cells that are associated with resistance to apoptosis and differentiation arrest in promyelocytes in the bone marrow. The aim of this study was to investigate the effect of Origanum vulgare aqueous extract on apoptosis induction in an acute promyelocytic leukemia cell line (HL-60). Materials and Methods: The viability of HL-60 cells under treatment with various doses of Origanum vulgare extract was assessed by using a cell cytotoxic assay. Then, IC50 values were determined after 24, 48, and 72 hours. The expression of Caspase8, Caspase9, Bax, Bcl2, and Nrf2 genes were measured by real-time PCR assay and different stages of apoptosis and necrosis in HL-60 cells were investigated using acridine orange/ethidium bromide double staining. Finally, data were introduced into SPSS software and analyzed by one-way ANOVA. Results: The results showed that Origanum vulgare extract decreased HL-60 cell survival and Caspase9, Caspase8, Bax, Bcl2, and Nrf2 gene expressions were changed after 72 hours of treatment with 1/5 of IC50 of Origanum vulgare extract. Also, morphological changes in the nucleus indicated apoptosis induction in HL-60 cells. Conclusion: It seems that the aqueous extract of Origanum vulgare leaves can induce apoptosis in an acute promyelocytic leukemia cell line (HL-60) under experimental conditions.