مطالعه تغييرات بيان Pdu-miR319a، Pdu-miR398a و ژن‌هاي هدف آن‌ها در اندام‌هاي زايشي بادام تحت تنش سرما

درخت بادام به دليل نياز سرمايي كم، به سرماي ديررس بهاره حساس بوده و همه ساله متحمل خسارات جبران‌ناپذيري توسط اين تنش مي‌شود. لازمه توسعه ارقام متحمل با استفاده از روش‌هاي مهندسي ژنتيك، شناخت مكانيسم‌هاي مولكولي دخيل در پاسخ‌گياه به تنش سرما مي‌باشد. در مطالعات اخير نقش مهم RNAهاي كوچك به ويژه ميكروRNAها در پاسخ و سازگاري گياهان به تنش‌هاي زيستي و غير‌زيستي اثبات شده است. از اين‌رو بر اساس نتايج توالي‌يابي sRNAهاي بادام از ميان ميكروRNAهاي پاسخ دهنده به تنش سرما، در اين مطالعه Pdu-miR319a و Pdu-miR398a-3pانتخاب و الگوي بيان آن‌ها به همراه ژن هدفشان در بين دو ژنوتيپ متحمل و حساس به سرماي بادام تحت تنش سرما مورد مقايسه قرار گرفتند. مواد و روش‌ها: در اين آزمايش بافت‌هاي زايشي بساك و تخمدان ژنوتيپ متحمل H و رقم حساس به سرماي Sh12 تحت تيمارهاي صفر و 2 درجه سانتي‌گراد قرار گرفتند. پس از استخراج RNA و سنتز cDNA، واكنش Real time PCR انجام و تجزيه و تحليل داده‌هاي بيان نيز با استفاده از روش ΔΔct 2 صورت گرفت. نتايج: ژن miR319a با اثر تنظيمي مثبت در پاسخ به هر دو سطح تنش سرما در هر دو ژنوتيپ شناسايي گرديد. كاهش بيان GAMYBlike در هر دو بافت زايشي ژنوتيپ H در پاسخ به تنش صفر درجه سانتي‌گراد و نيز در بافت تخمدان Sh12 در پاسخ به هر دو سطح تنش مشاهده شد. ژن TCP4 در ژنوتيپ H در پاسخ به هر دو سطح تنش افزايش معني‌داري را نشان داد. MiR398a-3p با اثر تنظيمي منفي در ژنوتيپ H شناسايي شد. اما افزايش بيان ژن CTR6 در هر دو بافت در پاسخ به تنش 2 درجه سانتي‌گراد مشاهده گرديد. در رقم Sh12 افزايش بيان miR398a-3p و كاهش بيانCTR6 در بافت تخمدان Sh12 در پاسخ به تنش 2 درجه سانتي‌گراد مشاهده شد. نتيجه‌گيري: با توجه به مشاهده افتراق بيان ژن‌هاي مورد مطالعه در بين دو ژنوتيپ متحمل و حساس، به منظور تكميل اطلاعات مولكولي در رابطه با عملكرد آن‌ها، توصيه مي‌شود بيان آن‌ها در ساير ارقام متحمل و حساس و تحت تيمار‌هاي مختلف تنش سرمايي نيز سنجيده شود و به دنبال آن عملكرد آن‌ها با استفاده از روش‌هايي نظير بيش بيان كردن ژن‌ها، تكنولوژي amiRNA و روش target mimicry بررسي گردد.