شناسايي پروتئين هاي دخيل در مراحل مختلف نمو برگ گندم با استفاده از الكتروفورز دو بعدي

با توجه به اهميت گندم شناسايي پروتئين هاي بيان شده در مراحل مختلف رشد براي اصلاح و بالا بردن كارايي توليد از اهميت خاصي برخوردار است. فاصله بين جوانه زني و آغاز پنجه زني را مرحله نمو برگ گويند. در مرحله نمو برگ جنين دانه داراي سه سلول آغازين برگ است كه پس از جوانه زدن مريستم رويشي‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌ رأس ساقه شروع به تقسيم نموده و منجر به ظهور برگ مي شود. در اين تحقيق از الكتروفورز دو بعدي جهت مطالعه و شناسايي يروتئين هاي دخيل در مراحل مختلف نمو برگ استفاده شده است. نمونه‌برداري در سه مرحله تك برگي، دو برگي و سه برگي صورت ‌‌گرفت. پروتئين ها براساس روش TCA استون از نمونه هاي مختلف برگ استخراج و با روش الكتروفورز دو بعدي جداسازي شدند. با آناليز ژل هاي حاصل از الكتروفورز دو بعدي تعداد 360 لكه ي پروتئيني تكرار پذير شناسايي شد. از اين تعداد، 31 لكه پروتئيني تغييرات معني داري را در سطح پنج درصد در مراحل مختلف نمو برگ نشان دادند. 55 درصد از پروتئين هاي شناسايي شده كاهش بيان و 19 درصد افزايش بيان نشان دادند، و 26 درصد از پروتئين هاي شناسايي شده تغييرات منظم و معني‌داري را نداشتند. در نهايت هر لكه پروتئيني با تغيير بيان معني دار، با توجه به وزن مولكولي، نقطه ايزوالكتريك، شكل لكه و با جستجو در مقالات مرتبط و سايت uniprot، به‌طور احتمالي مورد شناسايي قرار گرفت. نتايج نشان داد كه دامنه وسيعي از فعاليت هاي متابوليكي شامل فتوسنتز، تنفس، بيوسنتز پروتئين ها، انتقال پروتئين ها، مونتاژ و بسته‌بندي پروتئين ها، بيوسنتز كربوهيدرات ها، سيستم انتقال پيام، سم زدايي و فرايندهاي پايه اي ژنتيكي (همانندسازي، نسخه برداري و ترجمه) طي مراحل مختلف نمو برگ دچار تغيير شده اند. اكثر پروتئين هايي كه كاهش بيان نشان دادند از آنزيم هاي كلروپلاستي و تعدادي هم از آنزيم هاي ميتوكندريايي بودند و پروتئين هايي كه روند تغييرات آن‌ها افزايشي بود اكثراً از گروه پروتئين هاي ترميمي و محافظت كننده بودند.