شناسايي چند شكلي هاي ژن HSP70A1A در گوسفندان نژاد مهربان و رومانف با تكنيك PCR-SSCP

در اقليم هاي مختلف، نقش مقاومت سلولي به استرس هاي ناشي از تغيير دما از طريق خانواده اي از پروتئين ها كه اصطلاحاً، پروتئين هاي شوك گرمايي (HSP) ناميده مي شوند، كنترل مي شود. در پژوهش حاضر، شناسايي چند شكلي هاي تك نوكلئوتيدي موجود در مناطقي از ژن HSP70A1A در گوسفند بومي نژاد مهربان و گوسفند وارداتي نژاد رومانف به جهت ويژگي اين نژادها به سازگاري در اقليم هاي سردسيري، بررسي شدند. در مجموع، تعداد 141 حيوان شامل گوسفند نژاد مهربان (100 رأس) و گوسفند نژاد رومانف (41 رأس)، به طور تصادفي انتخاب و مراحل خونگيري و استخراج DNA طبق دستورالعمل هاي متداول انجام شد. سپس، واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) جهت تكثير اگزون ژن HSP70A1A (Oar_v4.0; Chr20, NC_019477.2) به اندازه 247 و 298 جفت باز انجام شد. همچنين، جهت تعيين چند شكلي نمونه ها از تكنيك PCRSSCP و متعاقب آن، توالي يابي مبتني بر سانگر استفاده شد. بر اساس نتايج SSCP، به طور مشابه در هر دو نژاد مهربان و رومانف تعداد 5 الگوي باندي مشاهده شد كه قطعات تكثير شده 247 و 298 جفت بازي به ترتيب دو و سه الگوي الكتروفوزي را دارا بودند. علاوه بر اين، هيچ تفاوتي در فراواني الگوهاي مشاهده شده بين اين دو نژاد گوسفند يافت نشد. همچنين، در اين نژادها نتايج توالي يابي وجود تعداد 5 چند شكلي تك نوكلئوتيدي (SNP) شامل g.26562252C A، g.26562261G C، g.26562270T C، g.26562273C T و g.26562279C T در قطعه 247 جفت بازي و تعداد سه چند شكلي تك نوكلئوتيدي شامل g.26561745T C، g.26561784C T و g.26561877G A در قطعه 298 جفت بازي شناسايي نمود. در مجموع، نتايج نشان داد كه، همه چند شكلي ها به غير ازg.26561745T C و g.26561877G A به طور معني داري خارج از تعادل هاردي واينبرگ هستند (P 0/05). به عنوان نتيجه گيري نهايي، با توجه به نقش پروتئين هاي شوك دمايي در مقاومت به استرس هاي محيطي، شناسايي اين چند شكلي ها مي تواند تاثير بسزايي در درك مكانيسم سازگاري به تحمل دمايي در نژادهاي گوسفندان بومي ايراني داشته باشد.