شناسايي، تعيين توالي و ارزيابي پايداري بيان هشت ژن مرجع گياه زعفران (.Crocus sativus L)

زعفران (.LCrocus sativus ) ارزشمندترين و گران‌ترين ادويه در سطح جهان است. كلاله‌هاي اين گياه منبع آپوكاروتنوئيدهاي با ارزشي مانند كروسين، پيكروكروسين و سافرانال هستند. مطالعات ترنسكريپتومي و بياني ژن‌ها يكي از مهم‌ترين مراحل در بررسي توليد متابوليت‌هاي ثانويه‌ در گياهان هستند. يكي از پيش‌نيازهاي مهم در اين گونه مطالعات، شناسايي ژن‌هاي مرجع قابل‌اعتماد و پايدار به‌منظور نرمال‌سازي بيان ساير ژن‌ها است. در پژوهش حاضر، با استفاده از ترنسكريپتوم گياه زعفران هشت ژن مرجع شناسايي و تعيين توالي شد، سپس ميزان پايداري بيان آن‌ها با استفاده از روش‌‌هاي غيرپارامتريك مورد بررسي قرار گرفت. نتايج تكثير و توالي‌يابي، جداسازي صحيح هشت ژن مرجع Actin، EF1، GAPDH، H3، MDH، TBP، UBC و UBQ را از گياه زعفران نشان داد. بررسي ميزان پايداري بيان ژن‌هاي مرجع نشان داد كه ژن‌هاي MDH و UBQ به‌ترتيب بيشترين ميزان پايداري را بين بافت‌هاي مختلف گياه زعفران داشته و كمترين ميزان پايداري مربوط به ژن‌ TBP بود. در اين پژوهش توالي هشت ژن مرجع در زعفران جداسازي و پايداري بيان آن‌ها براي اولين‌بار در بافت‌هاي مختلف اين گياه سنجيده شد. ژن‌هاي مرجع شناسايي شده در اين پژوهش مي‌توانند به‌عنوان ژن‌هاي پايدار براي نرمال‌سازي بيان ژن‌ها در مطالعات ترنسكريپتومي گياه زعفران به‌كار برده شوند.