تشخيص، بررسي فيلوژني و كلونينگ ژن G گليكوپروتئين ويروس سپتي سمي هموراژيك (VHSV) جدا شده از ماهي قزل آلاي رنگين كمان (Onchorhynchus mykiss)

بيماري سپتي ­سمي خونريزي ­دهنده از مهم­ترين بيماري ­هاي ويروس آزادماهيان مي ­باشد. ژنوم اين ويروس شامل شش ژن مي­ باشد كه مهم ­ترين آن­ ژن G (گليكوپروتئين) است و در ايمني ­زايي عليه اين ويروس نقش دارد. هدف از اين مطالعه شناسايي ويروس سپتي ­سمي خونريزي ­دهنده قزل­ آلاي رنگين­ كمان، مطالعه فيلوژني و كلونينگ ژن G ويروس در وكتور pTZ57r/t بود. پس از تشخيص ويروس سپتي ­سمي خونريزي­ دهنده به ­روش RT-PCR و كلونيگ ژن G داخل پلاسميد pTZ57r/t، پلاسميد نوتركيب سنتزشده به باكتري پذيرا (E.coli) منتقل گرديد. از كلوني ­هاي سفيد دربردارنده وكتور نوتركيب جهت استخراج پلاسميد استفاده شد. اندازه ژن G ويروس سپتي­ سمي هموراژيك bp 1523 مي ­باشد كه در اين پژوهش جهت تاييد كلونينگ از روش كلوني PCRو تعيين توالي اسفاده شد. بررسي­ هاي حاصل از اين مطالعه نشان داد كه ژن G با موفقيت در وكتور pTZ57r/t كلون گرديده است و مي­ توان ازآن جهت بيان گليكوپروتئين ويروس در وكتورهاي بياني به ­منظور توليد پروتئين استفاده كرد. نتايج حاصل شده از تعيين توالي ژن G نيز نشان داد كه ويروس شناسايي شده در اين مطالعه متعلق به ژنوتيپ Ia-2 بوده است. مطالعه حاضر نخستين تحقيقي است كه در كشور به ­منظور كلونينگ ژن Gويروس سپتي­ سمي خونريزي ­دهنده در وكتورهاي پلاسميدي انجام شده است.

no abstract