رديابي Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli و استفاده از روش بهينه‌شده در پايش سلامت توده‌هاي بذري لوبيا

Detection of Xanthomonas campestris pv. phaseoli and use of optimized method in bean seed lots health monitoring

بيماري سوختگي باكتريايي معمولي لوبيا با عاملXanthomonas axonopodis pv. phaseoli از بيماري­ هاي مهم بذرزاد لوبيا در اكثر مناطق كشت دنيا محسوب مي­ شود. استفاده از بــذر سالم و گواهي­ شده از راهكارهاي اصلي مقابله با گسترش اين بيماري به شمار مي ­رود، لذا ارزيابي سلامت بذور در بسياري از كشورها به­ صورت روتين در برنامه ­هاي گواهي انجام مي ­شود. در تحقيق حاضر آزمون ­هاي تشخيصي كشت روي محيط انتخابي، PCR و بيماري­ زايي بر روي رقم حساس خمين براي رديابي باكتريXanthomonas axonopodis pv. phaseoli بهينه ­سازي شد. اين روش­ هاي بهينه ­شده براي بررسي سلامت پارت­ هاي بذري لوبيا استفاده شدند. نتايج نشان داد كه استفاده از روش كشت روي محيط انتخابي پيش از آزمون PCR، به­ ميزان زيادي خطاي تمايز كلني­ هاي مشابه غير هدف از كلني­ هاي بيماري­ زاي باكتري را كاهش مي­ دهد. همچنين انجام آزمون PCR روي كلني­ هاي مشكوك جداشده از محيط­ هاي انتخابي در مقايسه با PCR بر روي عصاره بذر به ­دليل حذف ممانعت­ كننده­ هاي گياهي به ­ميزان بسيار زيادي، امكان واكنش كاذب دروغين را كاهش مي ­دهد. روش ­هاي مذكور براي بررسي سلامت نمونه­ هاي بذري منتخب از مزارع بذري استاندارد با موفقيت استفاده شد و نتايج حاكي از احراز سلامت بذور و عدم آلودگي به باكتريX. axonopodis pv. phaseoli در توده ­هاي بذري منتخب گواهي ­شده كشور است.

Common bacterial blight, caused by the seed-borne bacteria Xanthomonas axonopodis pv. phaseol, is important seed borne disease in been culture area in the world. Using healthy and certified seed is the major key to success for control disease distribution so seed health testing is routinely carried out in the certification programs. In this study cultivation diagnostic tests on selective medium, PCR and pathogenicity on susceptible cultivar Khomain for detection of the bacteria X. axonopodis pv. phaseoli were optimized. These optimized methods were used for assessing the health of bean seed samples obtained from different seed lots. The results showed that the use of selective-medium in culturing bacteria prior to PCR test, greatly reduces differentiation error of similar non-target colonies from pathogenic ones. Also performing PCR on suspected colonies isolated from selected media compared to PCR of seed extract, due to the removal of plant inhibitors, it reduces the possibility of false feedback. The mentioned methods check the health of selected seed samples from standard seed farms successfully and the results indicated the authentication seed health and non-contaminated seed lots.