پديد آورندگان :
پورسعيد، راضيه دانشگاه تهران - پرديس كشاورزي و منابع طبيعي - دانشكده علوم و مهندسي كشاورزي , بِردي فتوحي فر، خليل دانشگاه تهران - پرديس كشاورزي و منابع طبيعي - دانشكده علوم و مهندسي كشاورزي , زارع، رسول سازمان تحقيقات، آموزش و ترويج كشاورزي تهران
كليدواژه :
توليدمثل جنسي , ماده بارور , نر بارور , رودخانه , تالاب
چكيده فارسي :
در اين تحقيق براي شناسايي ايديومورف هاي تيپ آميزشي و باروري جنسي، از برخي رودخانه‌ها، درياچه‌ها، تالاب‌ها و سدهاي واقع در 10 استان (آذربايجان‌شرقي، البرز، بوشهر، خراسان جنوبي، خوزستان، فارس، كردستان، گيلان، لرستان و مازندران) نمونه برداري شد. در هر محل، نمونه ها از سه بستر آب، رسوبات و كف (حباب‌هاي ريز روي آب) اخذ شدند. براي جداسازي جدايه‌ها از محيط‌كشت آب-آگار حاوي آنتي‌بيوتيك و دماي 25 درجه سلسيوس و نور متناوب و محيط‌كشت پپتون پي سي ان بي آگار حاوي آنتي‌بيوتيك استفاده شد. تعداد 51 جدايه از F. proliferatum به دست آمد. شناسايي ريخت‌شناختي روي محيط كشت‌هاي برگ ميخك-آگار، سيب‌زميني-دكستروز-آگار و SNA انجام گرفت. سپس جدايه‌ها با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي گونه شناسايي شدند. براي تعيين ايديومورف‌هاي تيپ آميزشي از آغازگرهاي طراحي شده بر اساس جايگاه‌هاي ژني MAT در آزمون multiplex PCR استفاده شد. از 51 جدايه، تيپ آميزشي 28 جدايه (9/54 درصد) از نوع MAT-1 و 23 جدايه (1/45 درصد) از نوع MAT-2 تشخيص داده شد. به منظور بررسي وضعيت باروري جنسي، جدايه-هاي يك تيپ آميزشي با تمام جدايه‌هاي تيپ آميزشي مخالف روي محيط‌كشت هويج-آگار تلاقي داده شدند. در مجموع 1288 تلاقي بين جدايه‌ها انجام گرفت. در نتيجه، در 102 تلاقي پريتسيوم‌هاي بارور مشاهده شدند كه آسكوسپورهاي توليد شده در آن‌ها 70 تا 80 درصد قابليت جوانه‌زني داشتند. پريتسيوم‌ها در تلاقي‌هاي چهار جدايه ماده بارور با جدايه‌هاي تيپ آميزشي مخالف توليد شدند. فراواني ايديومورف‌هاي تيپ آميزشي و وضعيت باروري جنسي جدايه‌هاي مورد بررسي، تاييد كننده احتمال وقوع توليدمثل جنسي بين جدايه‌هاي اين گونه در اكوسيستم هاي آبي مي‌باشد.
كليدواژه‌ها
چكيده لاتين :
In this study, in order to identification of mating type idiomorphs and possibility of sexual fertility samples were taken from rivers, lakes, lagoons and dams of 10 provinces (Alborz, Bushehr, East Azerbaijan, Fars, Guilan, Khuzestan, Kurdistan, Lorestan, Mazandaran and South Khorasan). In each site, samples were taken from three substrates of water, sediments and foam (small bubbles on water surface). Water-agar containing antibiotic and alternating light in 25°C and peptone-PCNB-agar containing antibiotic were used for isolation of the isolates. Fifty-one isolates of F. proliferatum were recovered and maintained. Isolates were identified using morphological characteristics on carnation-leaf-agar, potato dextrose agar and SNA culture media. Then, identification of isolates was done by species-specific primers. To detect the mating type idiomorphs of the isolates, idiomorph loci were amplified by multiplex PCR using the primers designed based on corresponding MAT loci. Of 51 isolates, 28 (54.9%) were determined as MAT-1 and 23 (45.1%) as MAT-2. To test sexual fertility of the isolates, each isolate was crossed with all isolates of opposite mating type on carrot agar culture medium, and total crosses of 1288 were done between the isolates. One hundred and two crosses resulted in fertile perithecia and ascospores recovered from fertile crosses had germination rate between 70–80%. Among successful crosses, four isolates were identified as female fertile. Distribution of mating type idiomorphs and fertility status of the isolates, confirms the probability of sexual reproduction among isolates in the aquatic ecosystems.
