عنوان مقاله :
اثر استرس كشت در محيط فاقد سرم بر نتايج كشت مختلط سلولهاي تك هسته‌اي طحال موش: معرفي تعديل‌گر ايمني جديد
عنوان به زبان ديگر :
Effect of serum starvation stress on the mouse spleen mononuclear cells mixed culture: Introducing a new immunomodulatory method
پديد آورندگان :
پارسامنش، گيلدا دانشگاه علوم پزشكي بابل، بابل، ايران - كميته تحقيقات دانشجويي , مهري، مريم دانشگاه علوم پزشكي بابل، بابل، ايران - كميته تحقيقات دانشجويي , شيخ زاده، مصطفي دانشگاه علوم پزشكي بابل، بابل، ايران - آزمايشگاه مركز نگهداري و پرورش حيوانات آزمايشگاهي , موسوي انيجدان، حسين دانشگاه علوم پزشكي بابل، بابل، ايران - دانشكده پيراپزشكي - بخش راديوتراپي - گروه آموزشي پرتوپزشكي , مصطفي زاده، امرالله دانشگاه علوم پزشكي بابل، بابل، ايران - پژوهشكده سلامت - مركز تحقيقات بيولوژي سلولي و مولكولي
كليدواژه :
پيوند مغز استخوان , تكنيك كشت سلول , موش , تنظيم ايمني
چكيده فارسي :
هدف: پيوند مغز استخوان و سلولهاي ايمني يك روش رايج براي درمان برخي از بيماري‌هاي خوني در سراسر جهان است. با اين حال به دليل بدتنظيمي سيستم ايمني استفاده از آن هميشه كارآمد نمي‌باشد. در اين مطالعه برآنيم تا پتانسيل استرس كشت در محيط فاقد سرم را در تنظيم سيستم ايمني ارزيابي كنيم.
مواد و روش‌ها: سلولهاي تك هسته‌اي طحال با استفاده از روش گراديان فايكول از موش‌هاي Balb/C و C57bl/6 جدا شدند. سلولهاي موش C57bl/6 در شرايط داراي سرم و فاقد سرم در نقاط زماني مشخص كشت يافتند و ميزان بقاء سلول‌ها به روش MTT تعيين گرديد. سپس جهت تعيين آلوژنيسيته‌ي سلولهاي مذكور، كشت مختلط لنفوسيتي (مدل آزمايشگاهي پيوند) با سلولهاي طحال موش Balb/C انجام شد و با استفاده از روش MTT تكثير سلولي مورد بررسي قرار گرفت و عكس‌هاي لازم تهيه گرديد.
يافته‌ها: ميزان بقاء سلولهاي ايمني پس از 72 ساعت كشت در محيط فاقد سرم نسبت به گروه كنترل 82/1% بود. هم‌چنين پس از 24 ساعت، آلوژنيسيته‌ي اين سلول‌ها نسبت به سلولهاي كنترل به‌طور معني‌داري كاهش يافت (0/01P<). اين كاهش در نقاط زماني 48و 72 ساعت بارزتر شد (0/0001P<)؛ به ميزاني كه پاسخ لنفوسيت‌هاي موش Balb/C به سلولهاي استرس يافته كم‌تر از سلول‌هايي بوده است كه هيچ‌گونه محركي دريافت نكرده‌اند (0/0001P<). يافته‌هاي مورفولوژي به وضوح اين كاهش را تائيد مي‌كنند.
نتيجه‌گيري: استرس ناشي از كشت در محيط فاقد سرم موجب كاهش آلوژنيسيته و تعديل آلوري اكتيويتي سلولهاي ايمني مي‌شود. در آينده استفاده ازمدل حيواني موش مي‌تواند كاربرد اين تكنيك را در پيوند مغز استخوان روشن‌تر سازد.
چكيده لاتين :
Introduction: Bone marrow and immune cell transplants are a common method of treating some blood diseases around the world. However, due to the malfunction of the immune system, its use is not always effective. In this study,
we evaluated the potential of culture stress in serum-free medium in regulating the immune system.
Materials and Methods: Spleen immune cells were isolated from Balb/C and C57bl/6 mice using the Ficol
gradient method. C57bl/6 mice splenocytes were cultured in serum starved and non-starved conditions at indicated
time points. Cell viability was determined by MTT assay. Then the allogenicity of these cells was determined by
mixed lymphocytic culture (in vitro model of bone marrow transplantation) with Balb/C mouse splenocytes and cell
proliferation was then examined using MTT method and necessary photographs were prepared too.
Results: The viability rate of starved immune cells after 72 h was 82.1% of the control group. After 24h, the
allogenicity of these cells decreased significantly compared to the control cells (P<0.01). This decrease was more
pronounced at 48h and 72 h (P<0.0001). Even the response of Balb/C lymphocytes to stressed cells was less than that
of background control, (P<0.0001). Morphological findings clearly confirm this reduction.
Conclusion: Serum starvation induced-stress decrease allogenicity and modulates immune cells allo-reactivity. In the future, the use of mouse model could shed light on the application of this technique in bone marrow transplantation.
