بررسي مولكولي شيوع و شناسايي اشريشيا‌كلاي انتروهموراژيك جداسازي شده از يك نوع پنير سنتي ايراني

Molecular investigation of the prevalence and detection of enterohemorrhagic Escherichia coli isolated from traditional cheese in Iran

هدف: سويه‌هاي اشريشياكلاي مولد شيگاتوكسين، يكي از عوامل اصلي ايجاد‌كننده مسموميت غذايي و بيماري‌هايي مانند كوليت خونريزي‌دهنده و سندرم اورمي هموليتيك هستند. عفونت‌هاي غذايي عمدتاً از طريق مصرف مواد غذايي با منشاء حيواني مانند گوشت و فرآورده‌هاي لبني منتقل مي‌شوند. بنابراين، هدف اين مطالعه، بررسي ژن‌هاي حدت در باكتري اشريشياكلاي جدا شده از نمونه‌هاي پنير سنتي شهر سمنان به روش Multiplex PCR مي‌باشد. مواد و روش‌ها: در اين بررسي 100 نمونه پنير سنتي مورد آزمايش و بررسي قرار گرفت. جدايه‌هاي اشريشياكلاي توسط روش‌هاي استاندارد ميكروبيولوژي و تست‌هاي بيوشيميايي شناسايي و جداسازي شدند. جدايه‌هاي اشريشياكلاي از نظر وجود ژن‌هايstx1 ،stx2 ، eaeA و ehlyA توسط روش PCR مورد بررسي قرار گرفتند. يافته‌ها: از نمونه‌هاي پنير مورد بررسي، تعداد 59 سويه اشريشياكلاي جداسازي شدند. كه از اين تعداد 55 جدايه داراي ژن‌هاي حدت بودند (93/2%) و از اين ميان 44 جدايه، حامل بيش از يك ژن حدت و 11 جدايه، تنها حامل يك ژن حدت بودند. Stx2 بيش‌ترين ژن حدت شناسايي شده در ميان جدايه‌ها تشخيص داده شد. نتيجه‌گيري: با توجه به شيوع اشريشيا‌كلاي‌هاي حاوي ژن‌هاي حدت در جدايه‌هاي اشريشياكلاي بيماري‌زا در پنيرهاي سنتي، به كارگيري روش‌هاي مولكولي به منظور بررسي كنترل كيفيت ميكروبي اين محصولات ضروري به نظر مي‌رسد.

Introduction: Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) strains are one of the main causes of food poisoning and diseases such as hemorrhagic colitis and hemolytic uremic syndrome. Food contamination mainly occurs through food of animal origin such as meat and dairy products. The aim of this study was to investigate prevalence and distribution of virulence genes in Escherichia coli isolates from traditional cheese from Semnan city, using multiplex PCR method. Materials and Methods: In this study, a total of 100 traditional cheese samples were screened for E. coli strains through conventional microbiological tests. Then, screening for virulence genes (Stx1, Stx2, eaeA and hlyA genes) was carried out by using PCR method. Results: Fifty-nine Escherichia coli strains were identified among 100 cheese samples. Of these, 55 isolates exhibited for one or more virulence genes (93.2%) which, 44 isolates carrying more than of one gene and 11 isolates were positive for the carrier of one gene. Stx2 showed the highest frequency of virulence gene in E. coli isolates. Conclusion: Therefore, due to the high prevalence of virulence genes in pathogenic E. coli isolates in traditional cheese, it is necessary to use molecular methods to control the microbial quality of these products.