وجود سويه هاي هليكوباكتر پيلور يبا خصوصيات ژنتيكي و مقاومت آنتي بيوتيكي مختلف در يك ميزبان منفرد

Co-Existence of Heterogene and Heteroresistance Helicobacter Pylori Strains in a Single Host

زمينه و هدف: هليكوباكتر پيلوري 1 داراي ناهمگوني ژنتيكي بالايي است كه در سازگاري با ميزبان جديد، انتشار وسيع و توانايي آن براي ايجاد بيماري هاي گوارشي مختلف نقش دارد. در اين مطالعه امكان حضور سويه هاي H. pylori با ژنتيك و الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي مختلف در معده يك فرد بررسي مي شود. روش بررسي: نمونه بيوپسي معده گرفته شده از 10 بيمار H. pylori مثبت بر روي محيط بروسلا آگار خون دار انتخابي كشت داده و در شرايط كم هوازي گرمخانه گذاري شد. از كشت اوليه هر بيمار چهار تك كلوني برداشته و كشت مجدد داده شد. كشت اوليه و چهار تك كلوني به دست آمده از هر بيمار براي تعيين حساسيت/ مقاومت آنتي بيوتيكي نسبت به نه آنتي بيوتيك رايج در ريشه كني )در غلظت MIC ( به روش رقت سازي در آگار استفاده شدند. تعيين ژنوتيپ سويه هاي H. pylori با تكثير ژن cagA و ناحيه نشانه ) s1 و s2 ( و مياني ) m1 و m2 ( ژن vacA انجام شد. يافته ها: در هفت بيمار نسبت به تتراسيكلين، پنج بيمار لووفلوكساسين، پنج بيمار مترونيدازول، سه بيمار اوفلوكساسين، پنج بيمار ريفامپين، دو بيمار فورازوليدون، يك بيمار آموكسي سيلين و يك بيمار كلاريترومايسين مقاومت نامتجانس مشاهده شد. با در نظر گرفتن همزمان ژن cagA و الل هاي vacA s و vacA m در چهار بيمار دو ژنوتيپ متفاوت و در سه بيمار سه ژنوتيپ متفاوت H. pylori ديده شد. نتيجه گيري: وجود سويه هاي H. pylori داراي تنوع ژنتيكي و مقاومت نامتجانس در معده يك فرد مي تواند بر نتايج درمان عفونت تاثير مستقيم داشته باشد. به همين دليل جهت بررسي دقيق و داشتن اطلاعات صحيح از عفونت H. pylori ، نمونه گيري از چند ناحيه معده به همراه بررسي تعداد 10 - 3 تك كلوني از كشت اوليه پيشنهاد مي شود.

Background: Helicobacter pylori (H. pylori) exhibits considerable genetic diversity, which contributes to adaptation to the new host, wide spread, and its ability to cause various gastrointestinal diseases. In this study, the possibility of the presence of H. pylori strains with different genetic and antibiotic resistance patterns in a single host was investigated. Materials and Methods: Gastric biopsy samples of 10 H. pylori-positive patients were cultured on selective brucella agar and incubated microaerobically. Four single colonies per patient were picked from the primary culture and sub-cultured to obtain pure H. pylori isolates. Antibiotic susceptibility/resistance of primary culture, as well as pure H. pylori, isolates to nine common antibiotics in eradication (in MIC) was assessed by agar dilution method. Genotyping was performed by amplification of cagA and signal (s1 and s2) and middle (m1 and m2) regions of vacA genes. Results: Heteroresistance was observed in seven patients to tetracycline, in five patients to levofloxacin, in five patients to metronidazole, in three patients to ofloxacin, in five patients to rifampin, in two patients to furazolidone, in one patient to amoxicillin, and in one patient to clarithromycin. Considering the cagA gene and vacA s and vacA m alleles, four patients carried H. pylori isolates with two different genotypes and three patients carried the isolates with three different genotypes. Conclusion: The presence of heterogeneous and heteroresistance H. pylori strains in a single host can have a direct impact on the treatment outcome of the infection. In this regard, in order to have accurate information on H. pylori infection in each individual, sampling of several gastric areas along with examining of 3-10 single colonies from the primary culture is recommended