جداسازي باكتريوفاژهاي موثر عليه باكتري اشريشيا كلي هموراژيك O157:H7

Isolation of Bacteriophages Affecting Enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7

زمينه و اهداف: اشرشيا كلي به‌ عنوان يكي از مهم‌ترين و شايع‌ترين پاتوژن‌ها و ميكروارگانيسم‌هاي فلور نرمال روده انسان و حيوانات مطرح است. يكي از سروتايپ‌هاي مهم اشرشيا كلي انتروهموراژيك O157:H7 است. به دليل مصرف بيش از حد و خودسرانۀ آنتي‌بيوتيك‌ها، مقاومت‌هاي دارويي چندگانه در مورد اين ارگانيسم‌ها افزايش يافته است. مشكل اصلي در درمان عفونت‌هاي ناشي از اشرشيا كلي وابسته بودن درمان آن به تجويز تعداد زيادي از آنتي بيوتيك‌هاي رايج و نيز مقاوم بودن تعدادي از سويه‌ها به آنتي بيوتيك‌ است. فاژدرماني، استفاده از فاژها با اهداف درماني براي از بين بردن عفونت‌هاي باكتريايي است و در اولين گام جداسازي و شناسايي باكتريوفاژهاي مؤثر بر باكتري مورد نظر ضروري است. مطالعۀ حاضر با هدف جداسازي فاژ مؤثر بر اشرشيا كلي O157:H7 انجام شد. مواد و روش‌كار: در اين مطالعه پس از اخذ نمونۀ فاضلاب، باكتريوفاژها به طريق فيلتراسيون و غني‌سازي در يك كشت شبانۀ اشرشيا كلي O157:H7 جدا شدند. حضور باكتريوفاژ با استفاده از مشاهدۀ پلاك در آگار دولايه تشخيص داده شد. يافته‌ها و بحث: نتايج مشاهده با ميكروسكوپ الكتروني حضور باكتريوفاژهايي با مشخصات ظاهري خانواده‌هاي سيستوويريده، مايوويريده و پودوويريده را نشان داد. در مطالعه حاضر، باوجودي‌كه متأسفانه به دليل كمبود بودجه تيتراسيون فاژها و مطالعه مولكولي انجام نشده است، ما با استفاده از مشاهدات تشكيل پلاك، فعاليت ضدباكتريايي فاژهاي جدا شده را مشاهده كرديم و وجود فاژهاي متعلق به خانواده هاي Cystoviridae ، Myoviridae و Podoviridae توسط ميكروسكوپ TEM تأييد شد. بنابراين فاژ مؤثر در برابر O157: H7 با موفقيت شناسايي، جداسازي و خالص شد.

Background: Escherichia coli is an important pathogen and microorganism of the normal intestinal flora of humans and animals. One of the important serotypes of E. coli is O157: H7. Because of the excessive and arbitrary use of antibiotics, multiple drug resistance has increased against these organisms. The main problem in treating infections caused by E. coli is its dependence on the administration of a large number of common antibiotics and the resistance of some strains to antibiotics. Phage therapy refers to the therapeutic use of phages to eliminate bacterial infections. In the first step, it is necessary to separate and identify bacteriophages that affect the target bacteria. Therefore, the present study was performed to isolate the phage that was effective on enterohemorrhagic E. coli isolates. Materials & Methods: In this study, after collection of sewage samples, bacteriophages were isolated by filtration and enrichment in an enterohemorrhagic E. coli overnight culture. The presence of bacteriophage was detected by plaque observation in a double layer agar and confirmed by TEM electron microscopy. Results and Conclusion: The results of the observation with electron microscopy revealed the presence of bacteriophage with the appearance of the Cystoviridae, Myoviridae and Podoviridae families. Unfortunately, although the titration of phages and molecular study were not performed in the current study due to the lack of budget, we found antibacterial activity of isolated phages using plaque formation observation, and the presence of phages belonging to Cystoviridae, Myoviridae and Podoviridae families was confirmed by TEM microscopy. Therefore, the effective phage against O157: H7 was successfully identified, isolated, and purified.