خصوصيات فيزيكوشيميايي و ايمني زايي پروتئين RiVax بارگزاري شده در نانو ذرات آلژينات

RiVax Loaded ALG Nanoparticles: Physicochemical and Immunological Characterization

ريسين يك گليكوپروتيين سمي است، كه از دو زير واحد (RTA) وRTB)) تشكيل شده است. دو كانديد واكسن بر اساس RTA شامل RiVax و RVEc وجود دارد. اگرچه مطالعات متفاوتي در مورد قدرت ايمن سازي RiVax، به تنهايي يا همراه با ادجوانت انجام شده است، اما سيستم تحويل جديد مانند نانوذرات براي بهبود ايمن سازي اين پروتيين تا به امروز مورد استفاده قرار نگرفته است. هدف از اين مطالعه، سنتز نانوذراتNPs)) آلژينات حاوي RiVax و ارزيابي پارامترهاي فيزيكوشيميايي و پتانسيل ايمن سازي اين سيستم در مقايسه با RiVax خالص بود. در اين پژوهش، پس از تخليص RiVax، از روش ژلاسيون يوني براي تهيه نانوذرات آلژينات استفاده شد كه روشي ساده و مناسب براي مواد حساس به گرما است. سپس، نانوذرات حاوي RiVax و پروتيين خالص در گروه هاي متفاوت موش تجويز شد. 8 هفته پس از آخرين واكسيناسيون، موش ها مورد تجزيه و تحليل قرار گرفتند. نتايج نشان داد كه اندازه نانوذرات تقريبا 190نانومتر بوده و الگوي آزاد سازي پروتيين از نانوذره آهسته است (12٪ پروتيين در طول 40 روز). همچنين، نتايج ايمن سازي نشان داد كه نانوذرات حاوي RiVax در مقايسه با RiVax خالص نمي توانند سيستم ايمني بدن موجود زنده را به طور محسوسي تحريك كنند. نتيجه گرفته شد كه نانوذرات آلژينات به دليل آزاد شدن آهسته RiVax از آن ها نمي توانند پاسخ ايمني قابل توجهي نسبت به پروتيين به تنهايي ايجاد كنند.

Ricin is a toxic glycoprotein, it consists of two subunits (RTA&RTB). There are two vaccine candidates based on RTA included RiVax and RVEc. Although different studies about immunized potency of RiVax, alone and with adjuvant, have been performed, but novel delivery system like nanoparticles to improve immunization of this protein has not been used until today. The purpose of this study was the synthesis of alginate nanoparticles (NPs) containing RiVax and evaluation of physicochemical parameters and immunization potential of this system as compared to naked RiVax. In this research, after purification of RiVax, Ionic gelation method was used to prepare alginate nanoparticles, which is a simple and suitable method for heat sensitive materials.Then, NPs containing RiVax and naked protein was administrated into different groups of mice. 8weeks after last immunization, the mice were analyzed. Results showed that the size of NPs was 190nm and the release pattern of protein from nanoparticle is slow (12%of protein during 40days). Also, immunization results showed that NPs containing RiVax compared to naked RiVax could not stimulate the immune system interestingly. We concluded that the alginate NPs could not be able to make a remarkable immune response compared to protein alone due to the slow release of RiVax from them.