عنوان مقاله :
ايجاد مقاومت به ويروس Y سيب زميني (PVY) با استفاده از سازه سنجاق سري حاوي ژن پروتئين پوششي
عنوان به زبان ديگر :
Induction of Resistance to Potato Virus Y (PVY) Using Hairpin Construct of Coat Protein
پديد آورندگان :
رهنما، حسن سازمان تحقيقات آموزش و ترويج كشاورزي كرج - پژوهشگاه بيوتكنولوژي كشاورزي ايران , قنبري جهرمي، مرضيه دانشگاه آزاد اسلامي واحد علوم و تحقيقات تهران , موسوي، امير پژوهشگاه ملي مهندسي ژنتيك و زيست فنآوري تهران - پژوهشكده بيوتكنولوژي كشاورزي , سهيلي وند، سعيد سازمان تحقيقات آموزش و ترويج كشاورزي كرج - پژوهشگاه بيوتكنولوژي كشاورزي ايران , پوررحيم، رضا سازمان تحقيقات آموزش و ترويج كشاورزي تهران - موسسه تحقيقات گياهپزشكي كشور
كليدواژه :
سيب زميني , مقاومت به ويروس , RNAi , PVY , خاموشي ژن
چكيده فارسي :
يكي از بيماري هاي مهمي كه سالانه خسارت هاي اقتصادي بسياري به كشاورزان كشور وارد مي كند و باعث افت عملكرد و كيفيت محصول مي شود، ويروس Y سيب زميني (PVY) است. امروزه استفاده از سازوكار هاي ايجاد مقاومت ناشي از پاتوژن افق هاي جديدي در راستاي توليد گياهان تراريخت مقاوم به ويروس گشوده است. در اين پژوهش از روش خاموشي ژن براي ايجاد مقاومت بر عليه PVY استفاده شده است. براي اين منظور از يك سازه ژني RNAi برگرفته از بخش پروتيين پوششي (CP) ژنوم PVY استفاده شد. سازه با استفاده از اگروباكتريوم به ريزنمونه هاي ميانگره و برگ گياه سيب زميني انتقال داده شد. درصد نوساقه هاي توليد شده در محيط انتخابي حاوي علفكش فسفينوتريسين پس از رشد و تكثير مورد ارزيابي قرار گرفت. تراريختي بوته ها و بررسي بيان ژن در گياهان تراريخته با استفاده از آزمون زنجيره اي پليمراز (PCR) و RT-PCR بررسي شد. بر اساس نتايج 42 درصد گياهان باززا شده تراريخته بودند. بيان ژن CP نيز در اغلب لاين ها به اثبات رسيد. به منظور تعيين مقاومت گياهان تراريخته در برابر آلودگي PVY، آزمون زيست سنجي صورت گرفت. نتايج حاصله نشان داد كه حدود 82 درصد گياهان سيب زميني تراريخت نسبت به آلودگي PVY مقاوم هستند.
چكيده لاتين :
Potato virus Y (PVY) is one of the most damaging viruses of potato plants which infects most cultivars and
causes a significant decrease in yield products quality and also economical losses annually. Recently, the
application of pathogen derived resistance mechanisms has opened new horizons for the development of
virus-resistant transgenic plants. This research was carried out to study RNA silencing to engineered potato
plants that are resistant to potato virus Y (PVY). RNAi construct was designed from coat protein (CP)
segment of PVY. Potato explants were transformed by Agrobacterium tumefaciens AGL1 with
pCAMRNAiCP containing bar selectable gene. The rate of regenerated plants was evaluated in the selected
medium containing the herbicide phosphinotricin after growth and propagation. Transgenic plants and their
gene expression were investigated using polymerase chain reaction (PCR) and RT-PCR. Results showed that
42 percent of regenerated plants were transformed. The expression of CP hairpin construct was determined by
RT-PCR analysis in most of the lines. PVY resistance bioassay showed that 82 percent of transgenic potato
plants were resistance to PVY.
عنوان نشريه :
مهندسي ژنتيك و ايمني زيستي