شيوع ژن هاي مرتبط با فاكتور ويرولانس و بيوفيلم در اسينتوباكتر بوماني جداشده از نمونه تنفسي بيماران بستري در بيمارستان امام خميني تهران، ايران در سال 1397

Prevalence Determination of Virulence Related and Biofilm Formation Genes in Acinetobacter baumannii Isolates from Clinical Respiratory Samples in Imam Khomeini Hospital, Tehran, Iran in 2018

اسينتو باكتر بوماني يك كوكوباسيل گرم منفي است كه در طبيعت انتشار وسيعي داشته و به عنوان يكي از عوامل مهم عفونت هاي بيمارستاني محسوب مي شود. به واسطه ايجاد مقاومت هاي آنتي بيوتيكي در اين باكتري، درمان موفقيت آميز بيماران با مشكلات فراواني روبرو و در پي آن منجر به مرگ و مير آن ها شده است. مطالعه حاضر براي بررسي 9 ژن بيماري زايي در نمونه هاي باليني اسينتوباكتر بوماني جداشده از بيماران طراحي و انجام گرديد. مواد و روش كار در اين مطالعه تعداد 50 نمونه اسينتوباكتر بوماني ذخيره شده در مركز كلكسيون ميكروارگانسيم هاي دانشگاه علوم پزشكي ايران كه جداشده از دستگاه تنفسي بيماران مراجعه كننده به بيمارستان امام خميني، تهران، ايران بودند، انتخاب شدند و با روش هاي ميكروب شناسي و بيوشيميايي تاييد گرديدند. پس از تاييد سويه ها، با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي، براي ژن هاي basD, plD, csuA)) و ژن هاي (surA, pbpG ,bfmR) و ژن هاي bap, ompA)) آزمون Multiplex PCR انجام شد. ژن espA به صورت جداگانه با PCR معمولي ارزيابي شد. نتايج به دست آمده از PCR در نهايت براي تعيين توالي دوطرفه به شركت پيشگام ارسال شد. يافته ها از بين 50 نمونه باليني اسينتوباكتر بوماني، نتايج حاصل از Multiplex PCR نشان داد كه به ترتيب فراواني دو ژن pbpG و bfmR (100%)50، فراواني ژن هاي bap و ,plD surA و csuA (98%) 49، فراواني ژن هاي ompA وbasD (96%) 48 و همچنين ژن espA (10%) 5 مشاهده شد. نتيجه گيري شيوع فاكتورهاي بيماري زايي در جدايه هاي اسينتوباكتر بوماني، بيشتر از 90% بود. به خصوص در مورد ژن هاي دخيل در تشكيل بيوفيلم، مي توان نتيجه گرفت كه اكثر سويه هاي مورد مطالعه، توانايي بالايي براي تشكيل ساختارهاي بيوفيلم دارند. افزايش ميزان شيوع بيمارستاني اسينتوباكتر بوماني، لزوم طراحي برنامه هاي حفاظتي نظير كنترل عفونت هاي ايجادشده در بخش مراقبت هاي ويژه را خاطر نشان مي كند. همچنين با استفاده از روش هاي مولكولي مي توان اين باكتري هاي پاتوژن را شناسايي و ويژگي مقاومت آنتي بيوتيكي آنها را تعيين كرد و متناسب با آن آنتي بيوتيك ها را تجويز نمود.

Acinetobacter baumannii is considered to be a re-emerging causative agent of nosocomial infections. There is a significant relation between pathogenicity of this bacterium and the numerous virulence factors. The purpose of this study was to investigate nine virulence factor genes in A. baumannii isolates derived from hospitalized patients. Materials and Methods A total of 50 A. baumannii isolates were recovered from patients with pneumonia in Imam Khomeini Hospital, Tehran, Iran. Following biochemical and microbiological identification of the bacteria, Multiplex PCR was performed for basD, plD, csuA genes, surA, pbpG, bfmR genes, and bap, ompA genes using specific sets of primers which were specifically designed for this study. The espA was identified separately by a Uniplex PCR assay. All amplified DNA fragments were sequenced for the products’ confirmation. Results Among the 50 clinical isolates of A. baumannii studied, bfmR and pbpG genes were reported in all samples (100%), bap, plD, surA, and csuA genes were collected from 49 samples (98%), 48 (96%) of these isolates had ompA and basD genes, and espA gene was observed in only five isolates (10%). Conclusion According to this study results, virulence factors genes in clinical A. baumannii have a prevalence rate more than 90%. Additionally, the high incidence rate of those genes related to biofilm formation indicates that most clinical strains have the ability to form biofilm structures.