واكنش ژنوتيپ‌هاي سوياي داراي آلل‌هاي ژن مقاومت (Rsv1) به آلودگي با سه سويه از ويروس موزائيك سويا

ژن‌هاي مقاومت گياه (R)، شناسايي هشدارهاي (Signals) غير بيماري‌زايي (Avirulent) مربوط به بيمارگرها را كه منجر به فعال‌سازي پاسخ‌هاي دفاعي گياه مي‌شوند، برعهده دارند. از مدت‌ها پيش تصور بر اين است كه تحت‌فشار انتخاب، نرخ موتاسيون بالاي ويروس‌هاي داراي ژنوم آران‌اي (RNA)، به همراه اندازه بزرگ جمعيت و فاصله كوتاه توليد نسل، باعث ظهور جهش‌يافته‌هايي (Mutants) از عوامل بيماري‌زا مي‌شود كه قادرند از شناسايي به‌وسيله ژن‌هاي R ميزبان فرار كنند. در اين مطالعه، پاتوسيستم Soybean mosaic virus (SMV) /Rsv1 براي شناسايي اين فرضيه بكار برده شد. ژنوتيپ‌هاي سوياي داراي آلل‌هاي مقاومتRsv1 با عصاره داراي نتاج ويروسي همسانه عفوني سويه‌هاي N، G7 و G7d ويروس موزائيك سويا روي گياهان سوياي حساس، مايه‌زني شدند. بعد از گذشت بيست و يك روز از مايه‌زني، گياهان فاقد علايم ويروسي توسط آزمون اليزاي غيرمستقيم (Indirect ELISA) بررسي شدند. يكي از ده گياه York و Kwanggyo و دو گياه از سي گياه Ogden مايه‌زني شده با عصاره داراي نتاج ويروسي به‌دست‌آمده از تكثير مولكول دي‌ان‌اي مكمل (cDNA) سويه N ويروس موزائيك سويا روي گياهان سوياي حساس كه در آزمايشگاه همسانه‌سازي شده بود (molecularly cloned SMVN يا pSMVN)، علايم ويروسي را نشان دادند و در آزمون الايزاي غير‌مستقيم، مثبت بودند. در مايه‌زني مكانيكي انجام شده با استفاده از عصاره به‌دست‌آمده از اين گياهان، مجدداً ويروس به گياهان York، Kwanggyo و Ogden منتقل شده و توانست با اين گياهان سازگار شود. بعد از انجام آزمون آرتي پي‌سي‌آر (RTPCR) و پي‌سي‌آر آشيانه‌اي (Nested PCR) و تعيين ترادف طول كامل سيسترون‌هاي HCPro (Helper ComponentProtease) و P3 ويروس، موقعيت جهش نقطه‌اي ايجادشده و اسيدآمينه رمز شده در اثر تغيير نوكلئوتيد در نقطه جهش، با استفاده از نرم‌افزار MEGA7 مشخص شد. در گياهان York و Kwanggyo، جهش نقطه‌اي در سيسترون HCPro و به ترتيب در موقعيت‌هاي نوكلئوتيدي 1138T و 1210A و در گياه Ogden، در سيسترون P3 ويروس و در موقعيت نوكلئوتيدي 3079A مشاهده شد.