نقش آنتي بيوفيلمي تريكلوزان بر جدايه هاي استرپتوكوكي واجد سورتاز A در كنترل پوسيدگي دندان

The Anti-Biofilm Role of Triclosan on the Activity of Streptococcal Isolates containing Sortase A in Control of Dental Caries

مقدمه يكي از رايج ترين مشكلات دوران كودكي ، پوسيدگي دندان بوده و استرپتوكوكوس موتانس رايج ترين باكتري عامل عفونت دندان است. اين مطالعه با هدف بررسي اثر تريكلوزان بر تشكيل بيوفيلم ناشي از فعاليت آنزيم سورتازA استرپتوكوكي در كنترل پوسيدگي دندان انجام شد. مواد و روش ها در اين مطالعه تجربي ، 150 نمونه از از سطح بوكال و لينگوال دندان هاي خلفي دندان دانش آموزان دبستاني در گرگان طي سال 1398 گرفته شد. سويه هاي استرپتوكوكوس موتانس با استفاده از تست هاي ميكروبيولوژيك و بيوشيميايي شناسايي شدند. ژن SrtA با استفاده از واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) با آغازگرهاي اختصاصي شناسايي شد. حداقل غلظت مهاري تريكلوزان بر جدايه ها به روش ميكرودايلوشن براث تعيين شد.تشكيل بيوفيلم و اثرات ضد بيوفيلمي تريكلوزان به روش ميكروتيتر پليت اصلاح شده بررسي شد. يافته ها فراواني استرپتوكوكوس موتانس 15.3 درصد بود كه 87٪ آن ها قادر به توليد بيوفيلم بودند. 19 جدايه (82/6%)واجد ژن srtA شناسايي شد. حداقل غلظت مهاري تريكلوزان كه رشد50% جدايه هارا مهار كرد(MIC50) 8 ميكروگرم بر ميلي ليتر بود كه 8 برابر كمتر از غلظت لازم براي مهار رشد 90 درصد جدايه ها بود(MIC90=64μg/ml)، به طوري كه 90% جدايه ها فاقد توانايي تشكيل بيوفيلم در غلظت MIC بودند. (P <0.05). نتيجه گيري نتايج نشان داد كه بين حضور سورتاز A و تشكيل بيوفيلم باكتريايي ارتباط وجود دارد و تريكلوزان اثر ضد بيوفيلمي خوبي را در شرايط آزمايشگاهي نشان داد.

Introduction One of the most common childhood problems is tooth decay and Streptococcus mutans is the most common bacterium that causes the infection. The purpose of the study was to investigate the effect of triclosan on biofilm formation due to streptococcal sortase A enzyme activity in the control of dental caries. Materials and Methods In this experimental study, 150 samples were taken from the buccal and lingual surfaces of posterior teeth of pupils in Gorgan in 2019. S. mutans strains were identified using conventional microbiological and biochemical tests. The SrtA gene was identified using polymerase chain reaction (PCR) with specific primers. The minimum inhibitory concentration (MIC) of triclosan against the isolates was determined by the broth microdilution method. Biofilm formation and antibiofilm effect of triclosan were assessed using the modified microtiter plate assay. Results The frequency of S. mutans was 15.3%, of which, 87% were capable of biofilm production. 19 isolates (82.6%) with the srtA gene were identified. The concentration of triclosan, that inhibited 50% growth of isolates (MIC50) was 8μg /ml, which was 8-fold less than the concentration required to inhibit the growth of 90% of isolates (MIC90=64μg/ml), so that 90% of the isolates lacked the ability to form biofilms at MIC concentration (P<0.05). Conclusion The results showed that there is a relationship between the presence of sortase A and the formation of bacterial biofilm and triclosan showed a good antibiofilm effect in vitro condition.