تاثير سيلي بينين بر تكثير سلولي و بيان ژن فاكتور رشد شبه انسولين-1 (IGF-1) در سلول هاي فيبروبلاست ختنه گاه انساني در محيط برون تني

Evaluation of Silibinin Effect on Insulin Like Growth Factor-1 (IGF-1) Expression and Cell Proliferation in Human Foreskin Fibroblast: An in Vitro Study

فيبروبلاست ها در تمام دوران زندگي قدرت ترميم را حفظ مي كنند، در توليد عوامل رشد دخالت دارند و در بين سلول هاي بافت همبند، ظرفيت تمايز به ديگر اعضا خانواده را دارا مي باشند. فاكتور رشد شبه انسولين-1 (IGF-1)[1] در تمايز و رشد رده هاي سلولي مختلف، نقش مهمي دارد. سيلي بينين، فعال ترين تركيب دانه هاي گياه خار مريم است كه تاثير آن بر سلول سرطاني مطالعه شده است. در اين مطالعه تاثير سيلي بينين بر بقاي سلولي و بيان ژن IGF-1 در سلول هاي فيبروبلاست ختنه گاه انساني (HFF) بررسي شد. روش كار ميزان سميت محلول سيلي بينين در غلظت هاي 10، 20، 40 و 60 ميكرومولار با آزمون MTT بر سلول هاي فيبروبلاست انساني پس از 24 و 48 ساعت و ارزيابي ميزان بيان ژن IGF-1، با آزمون Real time -PCR انجام گرديد. يافته ها نيمار سيلي بينين پس از 24 ساعت در مقايسه با كنترل داراي تاثيرات سمي بر فيبروبلاست ها بود. اما پس از 48 ساعت، تفاوت نسبت به كنترل معنادار نبود. پس از 24 ساعت تيمار، در غلظت هاي 20 تا60 ميكرومولار سيلي بينين، به طور معناداري بيان ژن IGF-1 سلول هاي فيبروبلاست نسبت به گروه كنترل افزايش داشت. نتيجه گيري سيلي بينين احتمالا به صورت وابسته به غلظت باعث القاي بيان ژن IGF-1 پس از تيمار 24 ساعته در سلول هاي فيبروبلاست مي شود. در بررسي سميت سلولي در غلظت 60 ميكرومولار بيشترين مرگ سلولي بعد از 24 ساعت مشاهده شد؛ از اين رو براي معرفي سيلي بينين به عنوان محرك تكثير فيبروبلاست ها نياز به انجام مطالعات گسترده تر مي باشد.

Fibroblasts are involved in production of growth factors which are effective on cells’ growth and differentiation. They are the most adaptable cells in connective tissue with significant capacity for differentiation to the other cell group. Insulin-like growth factor-1 (IGF-1) plays an important role in differentiation and growth of different cell lines. Silibinin is extracted from seeds of Silybum marianum, which it's effects in cancer cell lines, have been studied in limited studies. In this study we evaluated the silibinin effect on viability and IGF-1 gene expression in human foreskin fibroblast (HFF). Materials and Methods: The cytotoxic effect of 10, 20, 40 & 60 μM solution of silibinin was evaluated on HFF cells using MTT assay, after 24 & 48 hours. Then, the expression of IGF-1 gene was evaluated by means of real time-PCR. Results: Silibinin had toxic effect on HFF cells in dose-dependent manner after 24 hours of incubation in comparison with control group but no significant difference observed after 48 hours. Besides, after 24 hours of incubation, silibinin with a concentration of 20-40-60 μM significantly increased the IGF-1 gene expression in fibroblast cells in comparison with control group. Conclusion: Based on the results, silibinin significantly induces IGF-1 gene expression in dose dependent manner after 24 hours incubation with HFF cells. However, in cytotoxicity assay, concentration of 60 μM caused the highest rate of cell death after 24 hours. So, before introduction of this compound as a fibroblasts proliferation stimulant, more extensive studies are needed.