بررسي جهش‌هاي Ser217leu و Ala541thr ژن Elac2 در بيماران مبتلا به سرطان پروستات

Evaluation of the ELAC2 Ser217Leu and Ala541Thr Polymorphisms in the Patients with Prostate Cancer

سرطان پروستات، رتبه پنجم را در بين سرطان‌ها به خود اختصاص داده و دومين علت مرگ در اثر سرطان در بين مردان است. ژن elac2 كه روي ناحيه كرومزومي 17p11 قرار دارد، به عنوان يك ژن سركوبگر تومور شناخته شده است. برخي شواهد حاكي از آن است كه پلي مورفيسم هاي ser217leu و ala541thr ژن elac2 با خطر ابتلا به سرطان پروستات مرتبط هستند. هدف از انجام اين تحقيق بررسي پلي مورفيسم ‌هاي ser217leu و ala541thr در بيماران مبتلا به سرطان پروستات بود.روش بررسي: مطالعه حاضر يك تحقيق بنيادي مي باشد. در اين تحقيق، نمونه هاي خون از 64 فرد يك خانواده با سابقه ابتلا به سرطان پروستات جمع ‌آوري شد. dna ژنومي با استفاده از كيت استخراج dna شركت سيناكلون تخليص شد. توالي ‌هاي هدف نواحي ser217leu و ala541thr ژن elac2 به روش pcr و با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي تكثير شدند. سپس به منظور تعيين جهش ‌ها، محصولات pcr تعيين توالي شدند. آناليز نهايي به كمك به نرم‌افزار rest 2009 گرفت. هم‌چنين از نرم‌افزار spss version 16 و آزمون آماري -kolmogorov smirnov براي بررسي نرمال بودن داده‌ها و از آزمون t براي بررسي بيان ژن elac2 و ارتباط آن با فاكتورهاي t وn استفاده گرديد.نتايج: نتايج حاصل از تعيين توالي ناحيه ser217leu نشان داد كه 18/75 درصد جهش هموزيگوت leu/leu، 40/62 درصد هتروزيگوت leu/ser و 40/62 درصد نيز هموزيگوت نرمال ser/ser ديده شد. هم‌چنين در مورد ناحيه ala541thr، ميزان 18/75 درصد هتروزيگوت ala/thr و 81/25 درصد هموزيگوت نرمال ala/ala مشاهده شد. اما هموزيگوت جهش يافته thr/thr در هيچ يك از نمونه‌ ها يافت نشد.نتيجه‌گيري: همانطور كه در نتايج اين تحقيق ديده مي‌ شود، چند شكلي ‌هاي ser217leu و ala541thr در ژن elac2 با سرطان پروستات مرتبط هستند و ممكن است به‌عنوان نشانگر استعداد ابتلا به سرطان پروستات قابل استفاده باشند. هم‌چنين pcr و تعيين توالي ژن ‌ها مي ‌توانند به‌عنوان روش ‌هاي مناسبي براي غربالگري جهش ‌هاي مستعد كننده ابتلا به سرطان پروستات مد نظر قرار گيرند.

Prostate cancer is the fifth most common cancer in the world and the second leading cause of cancer death among men. The ELAC2 gene (HPC2 locus) on chromosome 17p11 has been identified as hereditary tumor suppressor genes in prostate cancer. Some evidence showed that ELAC2 Ser217Leu and Ala541Thr polymorphisms were associated with prostate cancer risk. The aim of this study was to investigate the ELAC2 Ser217Leu and Ala541Thr polymorphisms in the patients with prostate cancer. Methods: In this study, blood samples were collected from 64 persons of a family, which suspected to of having prostate cancer. The genomic DNA was extracted using Commercialthe commercial DNA extraction kit. ELAC2 Ser217Leu and Ala541Thr target regions were PCR amplified with specific primers. PCR products were then sequenced to determine mutations. The final analysis was performed using Rest 2009 software. AlsoFurthermore, SPSS software version 16 and Kolmogorov-Smirnov statistical test were used to evaluate the normality of the data and T test was used to evaluate the expression of ELAC2 gene and its relationship with T and N factors. Results: The results of gene sequencing for Ser217Leu mutation showed that 18.75% were mutant homozygote (Leu/Leu), 40.62% were heterozygote (Leu/Ser) and 40.62% were normal homozygote (Ser/Ser). In addition, for Ala541Thr, the Ala/Thr heterozygosity and Ala/Ala normal homozygosity were determined in 18.75% and 81.25%, respectively. There was not observed any mutant homozygosity (Thr/Thr) in these samples. Conclusion: The results of this study showed that Ser217Leu and Ala541Thr polymorphisms were associated with prostate cancer and might be used as susceptibility markers of prostate cancer. In addition, PCR and gene sequencing are very useful for screening the mutations of prostate cancer in clinical trials and diagnosis.