ارزيابي بيان پروتئين در مسير توليد بيوسورفكتانت از سودوموناس آئروژينوزا در حضور نانوساختار آهن برپايه SDS به روش وسترن بلات

Evaluation of protein expression in the bio surfactant production pathway of Pseudomonas aeruginosa in the presence of SDS-based iron nanostructure by Western blotting

رامنوليپيدها از مهمترين بيوسورفكتانت‌هاي‌گليكوليپيدي‌توليد شده ‌توسط‌ ‌باكتري سودوموناس‌آئروژينوزا مي‌باشند. در اين مطالعه بيان پروتئين‌هاي توليدكننده بيوسورفكتانت باكتري سودوموناس آئروژينوزا درحضور نانوساختار آهن با پوشش سديم دودسيل سولفات(Fe/SDS) مورد ارزيابي قرار گرفت. بيان آنزيم رامنوزيل ترانسفراز (Surfactant Protein A) توسطSDS-PAGE و وسترن‌بلات بررسي گرديد. آنزيم رامنوزيل ترانسفراز، با وزن مولكولي حدود 37 كيلودالتون روي ژل SDS-PAGE آناليز شد و توسط وسترن‌بلات تائيد گرديد. وجود نانوذرات برسطح باكتري توسط TEMو مورفولوژي نانوذرات توسط SEM بررسي گرديد. اتصال نانوذرات به بيوسورفكتانت ‌توسط TEM تأييد شد. بررسي نتايج بيان پروتئين نشان داد، بيان آنزيم رامنوزيل ترانسفراز تحت تاثير نانوذرات Fe/SDS بطور چشم‌گيري افزايش پيدا كرد و نسبت به نانوذرات ديگر و نمونه كنترل بالاترين بيان را نشان داد. درحالي‌كه نانوذرات SDS و Fe به‌تنهايي در بيان پروتئين مذكور موثر واقع نشده و تقريبا مشابه نمونه كنترل مي‌باشد. نتايج وسترن بلاتينگ SDS-PAGE تاييدي بربيان آنزيم رامنوزيل ترانسفراز تحت تاثير نانوذرات Fe/SDS بود. نتايج پژوهش‌حاضر بيانگر اهميت ‌نانوذرات Fe/SDS در افزايش بيان آنزيم رامنوزيل‌ترانسفراز در مسير توليد بيوسورفكتانت از سودوموناس آئروژينوزا مي‌باشد.

Rhamnolipids are one of the most important biosurfactants of glycolipids produced by Pseudomonas aeruginosa. In this study, the expression of biosurfactant producing proteins of Pseudomonas aeruginosa in the presence of sodium dodecyl sulfate coated iron nanostructure (Fe/SDS) were evaluated. The expression of Surfactant Protein A enzyme was investigated by SDS-PAGE and Western blot. The enzyme rhamnolipid transferase, with a molecular weight of about 37 kDa, was analyzed on SDS-PAGE gel and confirmed by Western blotting. The presence of nanoparticles on the surface of bacteria and the morphology of nanoparticles were investigated by TEM and SEM. The binding of nanoparticles to biosurfactants was confirmed by TEM. The results of protein expression showed that the confirmed of rhamnolipid transferase enzyme increased significantly under the influence of Fe/SDS nanoparticles and showed the confirmed compared to other nanoparticles and the control sample. While SDS and Fe nanoparticles alone are not effective in confirmed this protein and are almost identical to the control sample. Western blotting results of SDS-PAGE confirmed the expression of rhamnolipid transferase under the influence of Fe/SDS nanoparticles. The results of the present study indicate the importance of Fe/SDS nanoparticles in increasing the expression of rhamnolipid transferase enzyme in the production of biosurfactants from Pseudomonas aeruginosa.