بهينه‌سازي كشت سلول‌هاي دندريتيك نابالغ از سلول‌هاي مغز استخوان موش در شرايط عاري از اندوتوكسين

Optimized Mouse BMDC Isolation and Culture under Endotoxin-Free Conditions

درمان حساسيت‌‌‌‌زدايي از طريق حركات چشم‌‌ و پردازش مجدد (EMDR)، درماني تخصصي براي غلبه بر آثار ضربۀ عاطفي و تجارب ناراحت‌‌كننده است. اين پژوهش با هدف بررسي اثربخشي درمان حساسيت‌‌‌‌زدايي از طريق حركات چشم و پردازش مجدد مطابق الگوي AIP بر مؤلفه‌هاي هفت‌‌گانۀ استرس والدگري مادران كودكان ناشنوا، در شهر اهواز در سال 1397 انجام گرفت. مواد و روش‌ها: اين پژوهش از نوع نيمه‌‌آزمايشي با طرح پيش‌‌آزمون-پس‌‌آزمون با گروه كنترل و پيگيري بود. جامعۀ پژوهش شامل همۀ مادران داراي فرزند ناشنواي مشغول به تحصيل در مقطع ابتدايي بود كه از اين ميان، 30 نفر به شيوۀ در دسترس انتخاب و به‌صورت تصادفي، در دو گروه آزمايش و كنترل جايگزين شدند. اعضاي گروه آزمايش به‌صورت فردي و در 10 جلسه، تحت مداخلۀ درمان حساسيت‌‌‌‌زدايي از طريق حركات چشم و پردازش مجدد قرار گرفتند. در پايان، براي دو گروه پس‌آزمون اجرا شد و پس از گذشت 45 روز، آزمون پيگيري صورت گرفت. از پرسش‌نامۀ تنيدگي والدگري آبيدين براي جمع‌آوري داده‌ها استفاده گرديد. داده‌ها از طريق تحليل كوواريانس چندمتغيره و تحليل كوواريانس يك‌راهه تجزيه‌وتحليل شدند. يافته‌هاي پژوهش: نتايج، اثربخشي درمان حساسيت‌‌‌‌زدايي از طريق حركات چشم و پردازش مجدد مطابق الگوي AIP را بر مؤلفه‌هاي هفت‌گانۀ استرس والدگري در مادران كودكان ناشنوا نشان داد. بحث و نتيجه‌گيري: مي‌‌توان گفت كه حساسيت‌‌‌‌زدايي از طريق حركات چشم و پردازش مجدد، مداخله‌اي غيردارويي، نسبتاً كوتاه و مؤثر براي كاهش استرس والدگري مادران كودكان ناشنوا است.

Introduction: Dendritic cells are very important in basic studies and vaccine research, but isolation and culture of these cells face challenges due to their small number in tissues. Since there is no standard method, we addressed some of the factors affecting the efficiency of dendritic cell isolation and culture from BALB/c mouse bone marrow. Materials & Methods: Bone marrow cells isolated from femur and tibia, were seeded in plates and treated with GM-CSF. On day 3, half of the media was transferred to a new plate with fresh media plus GM-CSF. On day 5, cells were induced with CpG oligonucleotide. Cell survival as well as maturation markers of CD11C, MHC-II and CD86 were investigated by flow cytometry on day 5 (immature cells) and day 7 (mature cells). Ethics code: IR.PII.REC.1395.99 Findings: It was found that the presence of endotoxin in the culture of immature cells, significantly reduces the recovery of dendritic cells (p value <0.05). Less than one million cells seeded in non-treated 6-well plates and transfer of cells to a new plate on day 3 increased the efficiency of immature cell retrieval by preventing early maturation and premature death. Further treatment of immature cells with CpG on day 7 was used to induce the Th1 pathway. Significant difference (p value <0.05) with control group showed that CpG induces maturation after treatment with GM-CSF (without IL-4).