بررسي اثر پروتئين هاي نوتركيب فاكتور كشنده (LF) و فاكتور محافظت كننده (mPA) بر روي سلول‌هاي سرطاني انساني

The Effect of Recombinant Killer Factor (LF) and Protective Factor (mPA) Proteins on Human Cancer Cells

سرطان باعث حدود 13 درصد مرگ و مير انسان­ ها است و هنوز درمان مناسبي براي آن يافت نشده است. روش­ هاي متداول درمان سرطان مانند جراحي، شيمي درماني و راديو درماني داراي عوارض جانبي زيادي بوده و در بعضي موارد هيچ تاثيري بر روي درمان سرطان ندارد لذا ايجاد درمان­ هاي مناسب و هدفمند مي­ تواند انقلابي در درمان سرطان ايجاد كند. از روش هاي نوين مي­ توان ژن درماني و استفاده از ايمونوتوكسين­ ها را نام برد كه مي ­توانند تا درصد بالايي هدفمند عمل كنند. هدف از انجام اين تحقيق بررسي اثر پروتئين تغيير يافته PA كه فقط به سلول‌هاي سرطاني متصل مي­ گردد همراه با فاكتور كشنده (LF) بر روي سلول‌هاي سرطاني مي­ باشد. در اين راستا پروتئين هاي نوتركيب mPA و LF از باسيلوس سوبتيليس نوتركيب جدا شد و بعد از بررسي وجود باند پروتئين و غلظت آنها به ترتيب با استفاده از روش SDS-PAGE و بردفورد، اثر تركيبي از غلظت‌هاي مختلف اين پروتئين­ ها بر روي سلول‌هاي سرطاني ريه، پستان، پروستات و پانكراس با روش MTT بررسي شد. نتايج پژوهش نشان داد كه ميزان 75 نانوگرم از پروتئين نوتركيب LF و 50 نانوگرم از پروتئين نوتركيب mPA بيشترين تاثير در مرگ سلول‌هاي سرطاني داشته و باعث مرگ بيش از 98درصد انواع سلول‌هاي سرطاني مورد بررسي را داشت. با حصول اين نتايج اميد است كه با توليد توكسين­ هاي هدفمند مانند تركيب mPA و LF بتوان يك بعد جديد به درمان سرطان اضافه شود.

Cancer causes about 13% of human deaths and has not yet been properly treated. Conventional cancer treatment methods such as surgery, chemotherapy, and radiotherapy have many side effects and in some cases have no effect on cancer treatment, so creating appropriate and targeted therapies can revolutionize cancer treatment. New methods include gene therapy and using immunotoxins, which can act up to a high percentage. This study aimed to investigate the effect of modified PA protein that binds only to cancer cells along with lethal factor (LF) on cancer cells. In this regard, recombinant mPA and LF proteins were isolated from recombinant Bacillus subtilis and after examining the presence of protein bands and their concentrations using SDS-PAGE and Bradford methods, respectively, the combined effect of different concentrations of these proteins on lung cancer cells, Breast, prostate and pancreas were examined by MTT method. The results showed that 75 ng of recombinant LF protein and 50 ng of recombinant mPA protein had the greatest effect on cancer cell death and caused the death of more than 98% of the studied cancer cells. With these results, it is hoped that a new dimension can be added to cancer treatment by producing targeted toxins such as mPA and LF.