بررسي سميت سلولي متابوليت هاي ثانويه koyangensis Streptomyces و tunisiensis Streptomyces جدا شده از خاك هاي نمكي شهرگرمسار بر روي رده سلولي سرطان پستان انسان (MCF-7,IBRC C10082 )

Cytotoxicity effect of secondary metabolites of Streptomyces koyangensis and Streptomyces tunisiensis isolated from saline soils of Garmsar City on human breast cancer cell line (MCF-7, IBRC C10082)

سابقه و هدف: استرپتومايسس يكي از مهم­ترين ميكروارگانيزم‌هاي پروكاريوتي است كه متابوليت­ هاي ثانويه آنها خواص ضدميكروبي و ضدسرطاني بالايي دارند و سه چهارم آنتي بيوتيك ها توسط اين باكتري ها توليد مي شوند. يافتن تركيبات موثر جديد از اين ميكروارگانيسم ها ميتواند راهگشا در درمان سرطان ها هم باشد. هدف از اين مطالعه، جداسازي و غربالگري استرپتومايسس­ هاي هالوفيل يا هالوتولرنت از خاك غار نمكي گرمسار بود كه توانايي توليد متابوليت هايي با خاصيت سميت سلولي برعليه رده سلولي سرطان پستان انسان (MCF-7,IBRC C10082) دارند. روش بررسي: جداسازي استرپتومايسس­ ها از نمونه خاك به روش سريال دايلوشن انجام شد و بر روي استارچ كازئين آگار با 15% Nacl كشت داده شدند. براي شناسايي جدايه هاي استرپتومايسس بررسي ميكروسكوپي و ماكروسكوپي و حضور دي آمينوپايمليك اسيد (DAP ) در ديواره سلولي آنها انجام شد. اثر ضد سرطاني با استفاده از روش MTT ارزيابي شد و جهت شناسايي استرپتومايسس ها منتخب تعيين توالي 16SrRNA انجام شد. يافته­ ها: متابوليتهاي ثانويه دو جدايه استرپتومايسس كاهش 50% در غلظت µg/mL200 در برابر سلول هاي سرطان پستان انسان MCF-7 را نشان دادند. تجزيه و تحليل مولكولي نشان داد كه جدايه­ هاي انتخاب شده Streptomyces sp.2 100 % شباهت به koyangensis Streptomyces و sp.25 Streptomyces 95/4% شباهت به tunisiensis Streptomyces داشتند. نتيجه ­گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه متابوليتهاي ثانويه Streptomyces sp.2 و sp.25 Streptomyces داراي اثر سميت سلولي عليه رده سلولي سرطان پستان انسان MCF-7 هستند و متابوليت توليد شده توسط آنها ميتواند گزينه­اي براي تحقيقات بعدي و ارائه درمان موثرتر با عوارض جانبي كمتر در درمان اين بيماري باشد.

Background: Streptomyces is one of the most important prokaryotic microorganisms, and their secondary metabolites have high antimicrobial and cytotoxic properties. Three-quarters of the antibiotics known to be produced by these bacteria. As a result, finding new effective compounds from these microorganisms can be a way to treat cancer. The aim of this study was to isolate and screen halophilic or halotolent Streptomycetes from Garmsar salt cave soil that have the ability to produce metabolites with cytotoxic properties against human breast cancer cell line (MCF-7, IBRC C10082). Materials and methods: Isolation of Streptomyces from soil sample was done by serial dilution method and cultured on casein agar with 15% Nacl. The isolates were identified by microscopic and macroscopic examinations and the presence of diaminopalimic acid (DAP) in their cell wall. The cytotoxic effect was evaluated using MTT assay and 16SrRNA sequencing was performed to select selected streptomycetes. Results: Secondary metabolites of 2 Streptomyces showed a 50% reduction in the concentration of human breast cancer cells. Streptomyces sp.2 was 100% similar to Streptomyces koyangensis and Streptomyces sp.25 was 95.4% similar to Streptomyces tunisiensis. Conclusion: The results of this study showed that Streptomyces sp.2 and Streptomyces sp.25 secondary metabolites had cytotoxic effect against MCF-7 human breast cancer cell line. The metabolite produced by them can be an option for further studies and provide more effective treatment with fewer side effects in the treatment of this disease.