توسعه و يافتن اليگونوكلئوتيدها براي ماركرهاي گلبول قرمز تيپ B با هدف كاربرد در انتقال دارويي

Development of novel oligonucleotides targeting erythrocyte type B markers for drug delivery applications

آپتامرها با جنسي از اليگونوكلئوتيد به دليل توانايي در اتصال به اهداف مختلف با اختصاصيت و ويژگي بسيار بالا، مي‌توانند براي انتقال دارو بصورت اختصاصي به ملكول هدف به كار گرفته شوند. پاكسازي سريع كليوي داروهاي بر پايه نوكلئيك‌اسيد كه توسط عروق خوني منتقل مي‌شوند، يكي از مشكلات اساسي براي انتقال اين گونه داروها توسط سيستم قلبي عروقي مي‌باشد. براي حل اين مسئله در اين مطالعه يافتن و توسعه آپتامر براي گلبول‌هاي قرمز خون مبنا قرار گرفت زيرا گلبول‌هاي قرمز به راحتي در طول سيستم قلبي و عروقي جابجا مي‌شوند. گلبول‌هاي قرمز با دارا بودن ويژگي‌هاي خاص، گزينه بسيار مناسبي به عنوان انتقال‌دهنده فيزيولوژيك داروها در بدن مي‌باشند. بدين منظور با استفاده از گلبول‌هاي قرمز و هدف قرار دادن 4-O-((2-O-(β-D-fucopyranosyl)-3-O-(α-D-galactopyranosyl))-β-galactopyranosyl)-2-acetamido-2-deoxy-α-D-glucopyranoside در سطح گلبول قرمز سلكس سلولي (Cell-SELEX) انجام شد. بعد از 15 دور از سلكس، با سكانس كردن محصول نهايي، آپتامرهاي RNV544 و RNV543 شناسايي گرديد كه گزينه‌هاي مناسبي براي هدف قرار دادن گلبول‌هاي قرمز مي‌باشند. ميزان اتصال با استفاده از فلوسايتومتري براي RNV544 و RNV543 تاييد شد. نتيجه اين مطالعه يافتن آپتامرهايي بود كه توانايي اتصال اختصاصي به گلبول‌هاي قرمز تيپ B را دارند.

Nucleic acid aptamers have been emerged as potential molecules for target-specific drug delivery because of their ability to bind targets with very high affinity and specificity. Rapid renal clearance is one of the major issues associated with the vascular delivery of nucleic acid-based drugs. To circumvent this problem, this study was designed to envision the development of nucleic acid aptamers specific to human erythrocyte as erythrocytes travel through the cardiovascular system. Erythrocytes have special properties which make them peculiar and specific as a physiological carrier for drug delivery For this purpose, we have performed Cell-SELEX procedure using human erythrocytes containing 4-O-((2-O-(β-D-fucopyranosyl)-3-O-(α-D-galactopyranosyl))-β-galactopyranosyl)-2-acetamido-2-deoxy-α-D-glucopyranoside on the surface as a model target. After completing 15 rounds of selection, sequencing of the product identified RNV543 and RNV544 as potential oligonucleotides specific to the target human erythrocyte. The binding affinity of both RNV543 and RNV544 was confirmed by flowcytometry. This study showed there is Aptamers which can have specific binding to erythrocyte type B.