بررسي اثر هسپرتين بر تغييرات بافتي و ميزان بيان HSP70 در مغز متعاقب ايسكمي پرفيوژن مجدد عضلات اسكلتي موش صحرايي

The effect of hesperetin on tissue changes and HSP70 expression in the brain following ischemia-reperfusion of rat skeletal muscle

هدف از مطالعه حاضر ارزيابي اثرات هسپرتين بر آسيب بافت مغز به عنوان ارگان دوردست به دنبال ايسكمي پرفيوژن مجدد عضلات اسكلتي در موش صحرايي مي‌باشد. 30 سر موش صحرايي نر نژاد ويستار به صورت تصادفي در پنج گروه شش تايي، شامل: شم، ايسكمي پرفيوژن مجدد، هسپرتين (تزريق داخل صفاقي به ميزان mg/kg 50)، گروه دي متيل سولفوكسايد (mg/kg 5/1) و درمان مورد مطالعه قرار گرفت. جهت القاي ايسكمي عضلات اسكلتي، شريان‌راني به مدت دو ساعت مسدود شده و سپس 24 ساعت جريان خون برقرار گرديد. در انتها نمونه‌هايي از خون براي ارزيابي آنزيم‌هاي MDA و MPO اخذ شده و موش‌ها با رعايت اصول اخلاقي معدوم و از بافت مغز جهت بررسي هيستوپاتولوژي با رنگ‌آميزي هماتوكسيلين و ائوزين (H&E) و بررسي ايمونوهيستوشيمي HSP70 در فرمالين 10% به آزمايشگاه ارسال شد. سطح سرمي آنزيم‌هاي MDA و MPO در گروه ايسكمي نسبت به گروه درمان، به طور معناداري افزايش پيدا كرده بود (05/0>P). در ارزيابي‌هاي هيستوپاتولوژي، آسيب شديد همراه با ادم مغزي، پرخوني، نفوذ سلول‌هاي آماسي و همچنين تخريب بافت مغز در گروه ايسكمي مشاهده شد اما در گروه درمان به ميزان قابل توجهي بهبودي حاصل گرديد (05/0>P). در بررسي ايمونوهيستوشيمي بيان داخل سيتوپلاسمي HSP70 تنها در گروه ايسكمي قابل مشاهده و معنادار گزارش گرديد و در گروه‌هاي ديگر هيچ بيان معناداري در بافت مغز گزارش نگرديد. نتايج اين مطالعه حاكي از آن است كه هسپرتين سبب كاهش ميزان قابل توجهي از آسيب بافتي در مغز به عنوان ارگان دوردست به دنبال ايسكمي پرفيوژن مجدد عضلات اسكلتي خواهد شد.

The aim of this study was to evaluate the effects of hesperetin on brain tissue damage as a distant organ following skeletal muscle Ischemia–reperfusion in rats. 30 male Wistar rats were randomly divided into five groups of six, including: sham, reperfusion ischemia, Hesperetin (intraperitoneal injection of 50 mg / kg), dimethyl sulfoxide group (1.5 mg / kg) and treatment were studied. To induce skeletal muscle ischemia, the femoral artery was occluded for two hours and then blood flow was established for 24 hours. Finally, blood samples were taken to evaluate MDA and MPO enzymes, and then rats were euthanized according to ethical principles. Brain tissue was sent to the laboratory for histopathological examination by staining with hematoxylin and eosin (H&E) and immunohistochemistry of HSP70 in 10% formalin. Serum levels of MDA and MPO enzymes in the ischemia group were significantly increased compared to the treatment group (P <0.05). In histopathological evaluations, severe injury with cerebral edema, congestion, infiltration of inflammatory cells, and destruction of brain tissue was observed in the ischemic group, but significantly improved in the treatment group (P <0.05). In immunohistochemical study, intracytoplasmic expression of HSP70 was reported only in the significant ischemia group and in the other groups no significant expression was reported in brain tissue. The results of this study suggest that hesperetin significantly reduces tissue damage in the brain as a distant organ following ischemia-reperfusion of skeletal muscle.