ارتباط پلي مورفيسم ناحيه اي از ژن بتاديفنسين با ورم پستان باليني در گاوهاي شيري هلشتاين: يك مطالعه شاهد- موردي

Association Between β-Defensin Gene Polymorphism and Clinical Mastitis in Holstein Dairy Cows: A Case-Control Study

مقدمه و هدف در صنعت پرورش گاو شيري همزمان با انتخاب گاوهاي پرتوليد، اهميت شناسايي ژنوتيپ مقاوم به بيماري ها از جمله ورم پستان نيز تاكيد شده است. پلي مورفيسم ژن بتاديفنسين گاو مي تواند به عنوان يكي از نشانگرهاي مولكولي در انتخاب گاوهاي شيري مقاوم به ورم پستان مورد استفاده قرار گيرد. هدف از اين مطالعه، بررسي ارتباط موتاسيون نقطه اي ژن بتا-ديفنسين و وقوع ورم پستان باليني در گاوهاي شيري با استفاده از روش RFLP-PCR در جهت شناسايي ژنوتيپ مطلوب ژن بتاديفنسين گاو شيري مقاوم به ورم پستان بود. مواد و روش ها: از مجموع 73 گاو ماده (32 راس داراي سابقه بيماري ورم پستان و 41 راس فاقد سابقه) در يك گاوداري صنعتي نمونه خون در لوله هاي حاوي ضد انعقاد EDTA اخذ شد. پس از استخراج DNA، و تكثير ناحيه داراي پلي مورفيسم ژن بتاديفنسين گاو (393 جفت باز)، جهت تشخيص سريع پلي مورفيسم در ناحيه 2239 توالي ژن (تبديل باز C به T)، محصولات PCR، توسط آنزيم اندونوكلياز (NlaIII (Hin1II)) هضم آنزيمي شد. بررسي آماري نتايج مطالعه به وسيله آزمون مربع كاي (Chi-square) انجام گرفت. يافته ها: فراواني آلل هاي مربوط به ژن بتاديفنسين درمورد آلل C و آلل T در جمعيت گاوهاي مورد مطالعه به ترتيب 0/68 و 0/32 بود. نتايج اين مطالعه بيان گر ارتباط بين موارد ابتلا به بيماري ورم پستان و وجود پلي مورفيسم در ژن بتاديفنسين بود. بطوريكه، موارد ابتلا به بيماري ورم پستان در گاوهاي داراي آلل T نسبت به گاوهاي فاقد آن از نظر عددي كمتر بود. نتيجه گيري: برخي از پلي مورفيسم هاي ژن بتاديفنسين، مي تواند در برنامه هاي توليد مثلي به عنوان نشانگر مولكولي جهت انتخاب گاوهاي شيري به منظور كاهش تعداد موارد ابتلا به بيماري ورم پستان باليني مورد استفاده قرار گيرد.

Introduction and Objective: In the dairy industry, it is important to identify the genotypes resistant to mastitis while select high-yielding dairy cows. Bovine β-difensin gene polymorphism can be used as a molecular marker in the selection of mastitis-resistant dairy cows. The aim of this study was to investigate the relationship between point mutation of β4- difensin gene and the occurrence of clinical mastitis in the dairy cows using RFLP-PCR method and identification of superior genotype of dairy cows β-difensin gene for mastitis resistance. Material and Methods: blood sample (with EDTA anticoagulant) was taken from total 73 cows (32 with a history of mastitis and 41 with no history of mastitis) in an industrial dairy farm. After DNA extraction amplification of the region of bovine β-difensin gene (393 bp) was performed. PCR products were digested by endonuclease (NlaIII (Hin1II)) for rapid detection of polymorphism in the 2239 region of the β-difensin gene (C to T conversion). Statistical analysis was performed by Chi-square test. Results: Allele frequencies were 0.68 and 0.32 for C and T, respectively. Statistical analysis was performed by Chi-square test. The results of this study indicate the association between number of mastitis and polymorphism in the β-difensin gene. In other words, the incidence of mastitis was numerically lower in cows with T allele than in cows without it (p=0.07). Conclusion: It can be concluded that the bovine β-difensin gene can also be used as a molecular marker in the selection of dairy cows to reduce the incidence of mastitis.