ارزيابي اثر كامپفرول بر قابليت تكوين برون تني تخمك گوسفند در شرايط التهاب ناشي از ليپوپلي ساكاريد

Evaluating the Effect of Kaempferol on the Sheep Oocyte In Vitro Developmental Competence in Response to Inflammatory Effects Induced by Lipopolysaccharide

مقدمه و هدف امروزه آندوتوكسمي يكي از مهم ترين علل ناباروري در حيوانات مختلف يا انسان در اثر عفونت هاي مختلف باكتريايي است كه اين روند ناشي از ورود ليپوپلي ساكاريد موجود در ديواره سلولي باكتري هاي گرم منفي به داخل گردش خون مي باشد.ليپوپلي ساكاريد در فرآيندهاي پاتوژني كه منجر به ورم پستاني و التهاب رحم مي شود، دخالت دارد. مطالعه حاضر با هدف بررسي التهاب ناشي از ليپوپلي ساكاريد و اثر محافظتي كامپفرول كه يك فلاونوييد طبيعي است و داراي خواص ضد التهابي و آنتي اكسيداني مي باشد بر قابليت تكوين برون تني تخمك گوسفند انجام شد. مواد و روش ها براي اين منظور تخمك ها در محيط كشت بلوغ در آزمايش اول با غلظت هاي صفر، 1 0/0 ، 1 /0 ، 1 و 10 ميكروگرم در ميلي ليتر از ليپوپلي ساكاريد، در آزمايش دوم با غلظت هاي صفر، 1 /0 ، 1 و 10 ميكرومولار از كامپفرول و در آزمايش سوم با غلظت هاي صفر، 1 /0 ، 1 و 10 ميكرومولار از كامپفرول به همراه ليپوپلي ساكاريد به مدت 24 ساعت كشت داده شدند. بعد از بلوغ برون تني، تخمك هاي بالغ شناسايي و با اسپرم انكوبه شده لقاح داده شدند و درصد تسهيم و بلاستوسيست بررسي شد. يافته ها: نتايج بدست آمده نشان داد غلظت هاي 1 و 10 ميكروگرم در ميلي ليتر از ليپوپلي ساكاريد منجر به كاهش معني دار درصد بلاستوسيست در مقايسه با گروه كنترل شد (05<0/p)، اما مكمل سازي محيط كشت بلوغ با غلظت هاي مختلف كامپفرول تاثيري بر درصد تسهيم و بلاستوسيست تخمك ها نشان نداد (05/0>p). به علاوه نتايج مربوط به غلظت هاي مختلف كامپفرول به همراه ليپوپلي ساكاريد نشان مي دهد كه كامپفرول اثر معني داري بر درصد تسهيم و بلاستوسيست تخمك ها در شرايط التهاب ناشي از ليپوپلي ساكاريد ندارد (05/0>p). نتيجه گيري: به طور خلاصه با توجه به داده هاي به دست آمده مي توان نتيجه گرفت، ليپوپلي ساكاريد وابسته به غلظت اثرات منفي بر تكوين تخمك گوسفند دارد و كامپفرول در بهبود اين اثرات موثر نيست.

Introduction and Objective: Nowadays, endotoxemia is considered as one of the fundamental causes of infertility in different animals or humans due to various bacterial infections because of the entry of lipopolysaccharide (LPS) in the membrane of the gram-negative bacteria’s wall into the blood. This study aimed to evaluate the inflammation caused by LPS and the protective effect of kaempferol (KAE), which is a natural flavonoid with anti-inflammatory and antioxidant properties on oocytes developmental competence. Material and Methods: For this purpose in oocyte maturation medium, in the first experiment with concentrations of 0, 0.1, 0.1, 1 and 10μg/ml of LPS, in the second experiment with concentrations of 0, 0.1, 1 and 10 μM of KAE and in the third experiment with concentrations of 0, 0.1, 1 and 10 μM of KAE with LPS were cultured for 24 hours. After in vitro maturation, mature oocytes were identified and fertilized with incubated sperm, and the rates of cleaved oocyte and oocytes reached to blastocyst stage were analyzed. Results: The treatment with 1 and 10 μg/ml of LPS significantly reduced blastocyst rate compared to the control group (p<0.05), but supplementation of oocyte maturation medium with different concentrations of KAE had no effect on the rates of cleaved oocyte and oocytes reached to blastocyst stage (p>0.05). In addition, the results of different concentrations of KAE with LPS show that KAE did not has no significant effect on the rates of cleaved and blastocyst oocyte inflammatory conditions caused by lipopolysaccharide (p>0.05). Conclusion: In summary, the data presented here have shown that LPS exhibits detrimental effects on sheep oocyte development in a dose-dependent manner and KAE is not effective in ameliorating these effects.