بررسي الگوي بيان PdumiR160a ، PdumiR168 و PdumiR171a و ژن هاي هدف آن ها در اندام هاي زايشي بادام در پاسخ به تنش سرما

Study the expression pattern of Pdu-miR160a, Pdu-miR168 and Pdu-miR171a and their target genes in reproductive tissues of almond in response to cold stress

سرماي ديررس بهاره به‌عنوان مهم­ترين محدوديت محيطي براي بادام محسوب مي­شود و به‌واسطه صدمه به بافت­هاي زايشي همه ساله منجر به خسارت قابل توجهي در توليد محصول آن مي­شود. از آن­جايي كه اطلاعات بسيار محدودي دررابطه با پاسخ اين گياه به تنش سرمازدگي بهاره وجود دارد و از طرف ديگر با توجه به نقش مهم تنظيمي miRNA‌ها در بسياري از شبكه­هاي تنظيمي، بر اساس اطلاعات حاصل از آناليز نتايج توالي‌يابي RNA و sRNA‌هاي بادام، سه ژن Pdu-miR160a، Pdu-miR168 و Pdu-miR171a به‌عنوان miRNA‌هاي پاسخ دهنده به تنش سرما به‌همراه ژن­هاي هدف­شان انتخاب و به‌منظور تأييد نتايج توالي­يابي، بيان آن­ها با استفاده از روش RT-qPCR در اندام­هاي زايشي دو ژنوتيپ متحمل H و حساس به سرماي Sh12 تحت دو تيمار تنش صفر و 2- درجه سانتي‌گراد مورد بررسي قرار گرفت. نتايج، نقش تنظيمي منفي سه miRNA مورد مطالعه را در پاسخ به هر دو تيمار تنش سرمايي در ژنوتيپ H نشان داد. اما بر خلاف ژنوتيپ H، نقش تنظيمي مثبت Pdu-miR168 و Pdu-miR171a در پاسخ به تنش سرما در رقم Sh12 آشكار شد. نتايج آزمون همبستگي پيرسون، وجود همبستگي منفي بين Pdu-miR160a و PduARF18 تحت هر دو تنش سرمايي را تنها در اندام­هاي زايشي بساك و تخمدان رقم Sh12 نشان داد. اين در حالي بود كه وجود همبستگي منفي ميان Pdu-miR168 وPduAGO1 تنها در تخمدان ژنوتيپ H تحت هر دو تنش تيمار سرمايي مشاهده شد. همچنين اثر تنظيمي منفي Pdu-miR171a بر ژن هدف PduSCL6 تحت تنش 2- درجه سانتي­گراد در تخمدان ژنوتيپ H و هر دو بافت زايشي رقم Sh12 آشكار شد.