تعيين فعاليت آميلازي قارچ هاي گرمادوست جداسازي شده از خاك بكر و كمپوست در استان كرمانشاه

Determination of amylase activity of thermophilic fungi isolated from soil and compost in Kermanshah Province

قارچ‌هاي گرمادوست آنزيم‌هاي مختلفي توليد مي‌كنند كه علاوه بر فعاليت بيوكاتاليستي در پروسه هاي بيولوژيكي در بسياري از صنايع از جمله صنايع غذايي، كاغذ، مواد شوينده، مواد دارويي، حذف ضايعات سمي و حفاري نفت به‌طور گسترده استفاده مي‌شوند. استحصال آنزيم­ها و به ويژه آميلاز از قارچ­هاي گرمادوست كمك شاياني به صنعت و اقتصاد جهاني كرده است به طوري كه يكي از شاخصهاي رونق اقتصادي در كشور­هاي پيشرفته بهره­مندي از اين آنزيم است. هدف از اين تحقيق جداسازي و شناسايي قارچ­هاي گرمادوست از خاك، كمپوست ضايعات شهري و كمپوست قارچ خوراكي و بررسي توانايي توليد آنزيم آميلاز در جدايه­ها مي­باشد. جداسازي به روش سري رقت روي محيط كشت عصاره سيب‌زميني-دكستروز-آگار در دماي 45 و 50 درجه سلسيوس انجام شد. شناسايي مولكولي جدايه­ها با تكثير ناحيه ITS rDNA (ITS1–5.8S–ITS2) با استفاده از آغازگرهاي عمومي ITS1 و ITS4 طي واكنش زنجيره‌اي پليمراز انجام شد. فعاليت آميلازي جدايه­ها در محيط كشت آگاردار حاوي نشاسته بررسي گرديد كه با توجه به هاله روشن ايجاد شده در اطراف پرگنه­ها پس از 48 ساعت در دماي 37 درجه سلسيوس اكثر جدايه­ها قادر به تجزيه و فعاليت آنزيمي بودند. بيشترين هاله روشن و فعاليت آميلازي مربوط به يك گونه از Thermomyces sp. و به دنبال آن گونه­هاي Malbranchea cinnamomea، Thermomyces dopuntii ، Thermomyces lanuginosus، Absidia sp.، Aspergillus nidulance، Aspergillus fumigatus، Aspergillus niger و Aspergillus terreus بترتيب داراي بيشترين فعاليت آميلازي بودند. دو گونه‌ Thielavia arenaria و Melanocarpus albomyces هيچگونه فعاليتي مبني بر توانايي توليد آنزيم آميلاز از خود نشان ندادند. اين اولين بررسي جامع در خصوص قارچ­هاي گرمادوست داراي توانايي توليد آنزيم آميلاز در ايران است. تمام جدايه­هاي مطالعه حاضر جهت نگهداري به موسسه تحقيقات گياهپزشكي كشور ارسال شدند.