تأثير افزودن آنتي‌اكسيدان هدفمند 4،2-دي‌نيتروفنل بر بهبود فرا سنجه‌هاي كمي و كيفي اسپرم قوچ قزل طي فرايند انجماد-يخ گشايي در فصل غيرتوليدمثلي

Effect of targeted antioxidant 2, 4 dinitrophenol on improving qualitative and quantitative parameters of Ghezel ram sperm after freeze-thawing process during non-breeding season.

ميتوكندري بعنوان موتور تأمين‌كننده انرژي اسپرم داراي خواص منحصربفردي از جمله عدم نفوذپذيري آنتي‌اكسيدانت است، به همين خاطر غلظتROS موجود در اين اندامك 5 الي 10 برابر غشاء پلاسمايي است. بنابر اين محققين آنتي‌اكسيداني طراحي كردند كه توانايي عبور از غشاء ميتوكندري را داشته باشد و بتواند ROS موجود در اين اندامك را مهار نمايد تا آسيب‌هاي اكسيداتيو وارده بر اين اندامك را به حداقل برساند. آنتي‌اكسيدان هدفمند 4،2-دي‌نيتروفنل توانايي عبور از غشاء ميتوكندري را دارا است. هدف پژوهش حاضر افزودن سطوح مختلف آنتي‌اكسيدان هدفمند به مايع مني جهت پاك‌سازي ميتوكندري از گونه‌هاي فعال اكسيژن، كاهش آسيب‌هاي ناشي اكسيداسيون جهت بهبود تحرك اسپرم و زنده‌ماني اسپرم است. در اين مطالعه از 8 رأس قوچ نژاد قزل با سن 2 سال، بوسيله واژن مصنوعي در اوايل فصل بهار اسپرم‌گيري شد، پس از ارزيابي اوليه نمونه‌ها در صورت نرمال بودن باهم مخلوط شده و پس از رقيق‌سازي سطوح0، 0/25، 0/5، 0/75 و 1 نانومولار 4،2-دي‌نيتروفنل به نمونه‌ها افزوده‌شد. پس از 2 ساعت سردسازي، نمونه‌ها منجمد شدند. پس از يك ماه نمونه‌ها ذوب شده و از نظر پارامتر‌هاي حركتي، زنده‌ماني، سلامت غشاء، اسپرم ناسالم و ميزان ليپيد‌پراكسيداسيون اندازه‌گيري شدند. بر اساس نتايج بدست‌آمده افزودن 0/5نانومولار سبب افزايش معني‌دار (0/05>P) پارامترهاي حركتي و كاهش اسپرم‌هاي ناسالم و همچنين سطوح 5/0و75/0 نانومولار سبب افزايش معني‌دار زنده‌ماني و افزايش معني‌دار سلامت غشا و كاهش ميزان ليپيد پراكسيداسيون شد (0/05 >P).

Mitochondria, as sperm energy supplier motors have unique properties including antioxidant non-permeability, so the ROS concentration in this organelle is 5 to 10 times more than that of the plasma membrane. Therefore, researchers have designed an antioxidant which can cross the mitochondrial membrane and is able to inhibit ROS in this organelle to minimize the oxidative damage in it. Targeted antioxidant 4, 2-dinitrophenol has the ability to cross the mitochondrial membrane. The purpose of this study was to add different levels of targeted antioxidant to semen to purify mitochondria from reactive oxygen species, reduce oxidative damage to improve sperm motility and viability. In this study, 8 Ghezel rams (2 years old) were used for semen collection by artificial vagina in early spring. After initial evaluation, the samples with normal properties were pooled and after dilution process, 0, 0.25, 0.5, 0.75, and 1 nM 4, 2-dinitrophenol were added to the samples and frozen after 2 hours of cooling. The samples were thawed after one month and evaluated for motility parameters, viability, membrane health, abnormal sperm and lipid peroxidation. Results showed that addition of 0.5 nM of the antioxidant significantly increased motility parameters and decreased abnormal sperm (P <0.05). Also the levels of 0.5, 0.75 nM 4, 2-dinitrophenol significantly increased viability and membrane integrity and reduced the amount of lipid peroxidation (P <0.05).