اثر ژنAtEXPB2 بر روي برخي از صفات زايشي و رويشي گياه تراريخت توتون تحت شرايط نرمال

Effect of foliar application of zinc, iron, and manganese on morphological, and phytochemical traits of hyssop (Hyssopus officinalis L.)

اسيدي‌شدن ديواره‌سلولي معتبرترين علت توسعه‌پذيري سريع سلول‌ها است. اكسپنسين‌ها نوعي پروتئين سست كننده ديواره سلولي هستند كه به‌واسطه تغييرات pH، قادربه انبساط ديواره سلولي مي‌باشند. در اين تحقيق ژن AtEXPB2 با استفاده از روش تراريختي برگي توتون، به اين گياه منتقل‌شد. گياهان حاصل از باززايي روي محيط انتخابي (داراي كانامايسين) گزينش‌ و به گلخانه منتقل‌شدند. براي اثبات تراريختي گياهان، استخراج DNA انجام و با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي طراحي ‌شده ژن AtEXPB2 آزمايش PCR انجام شد. سپس از گياهان كشت‌شده در گلخانه بذرگيري شد و از سه لاين تراريخت در ادامه كار استفاده‌شد. اين بذور در روي محيط كشت انتخابي حاوي كانامايسين كشت‌شدند و تنها گياهچه‌هاي تراريخت قادر به ادامه رشد در اين محيط بودند. سپس گروهي از اين گياهان تراريخت به گلخانه و گروهي به‌منظور بررسي صفات مورفولوژيكي ريشه به گلدان‌هاي حاوي محلول غذايي هوگلند منقل‌شدند. بررسي‌ها نشان‌داد كه در اكثر صفات موردمطالعه، گياهان تراريخت داراي اندام‌هاي بزرگ‌تري هستند. براي نمونه افزايش تعداد كپسول، وزن‌كل بذرها، وزن‌تر ريشه و غيره مشاهده‌شد كه نقش اين ژن را به‌عنوان تنظيم‌كننده رشد عمومي براي حصول گياهان تراريخت با اندام بزرگ‌تر و همچنين متحمل به تنش‌هايي از قبيل شوري و خشكي پيشنهاد مي‌‌كند

Acidification of cell wall is the most valid cause of fast cell expansion. Expansins are a kind of wall loosening protein that can expand wall through pH changes. In this study AtEXPB2 genewas transferred to tobacco plant. Regenerated plants were cultured in selective medium (contained kanamycin) then transgenic plants were selected and afterward transmitted to greenhouse. To confirm transgenic plant DNA was extracted from them and PCR was down via specific primer of AtEXPB2. Seed was collected from transgenic plants and seed of three transgenic lines were cultured in MS selective medium. Transgenic seedlings tolerate medium which contain kanamycin. Subsequently some of these seedlings were grown in greenhouse and others were grown in Hoagland nutrient solution for evaluating root morphology. The results indicated that transgenic lines had bigger organs in most of the measured traits. For example capsule number, total seed weight, root length, root fresh weight and so on were increased in transgenic lines in comparison to wild type plant. These results suggested a specific role for this gene as a common growth regulator that could be used to produce transgenic plants with larger organs as well as tolerant to stresses like drought and salinity.