شناسايي مولكولي ويروس سياه شدن سلول ملكه و تك ياخته نوزما در زنبورستان هاي استان هاي البرز، تهران و مازندران

Molecular detection of Black queen cell virus and Nosema in apiaries of Alborz, Tehran and Mazandaran provinces

ويروس سياه شدن سلول ملكه يك عامل بيماريزاي ويروسي نوزادان ملكه در كلني­ هاي زنبورعسل است كه باعث ايجاد تلفات قابل توجه در نوزادان ملكه مي ­شود. اين ويروس سبب مي‌شود ديواره سلول ملكه به رنگ قهوه ­اي تيره تا سياه تغيير رنگ دهد. در سلول ­ها، نوزاد ملكه در اثر ابتلا به بيماري و تكثير ويروس در زمان شفيرگي و يا پيش ­شفيرگي مي ­ميرد. هدف از اين مطالعه تعيين ميزان آلودگي زنبورستان­ هاي استان­هاي البرز، تهران و مازندران از نظر ويروس سياه شدن سلول ملكه و تك ياخته نوزما بود. نمونه ­برداري از 154 زنبورستان‌ در 3 استان مذكور با همكاري سازمان دامپزشكي كشور انجام شد. از هر زنبورستان حدود 100 عدد زنبور عسل بالغ نمونه‌گيري شده و به بخش تحقيقات زنبورعسل، كرم ابريشم و حيات ‌وحش موسسه رازي ارسال گرديد. نمونه­ ها ابتدا از نظر نوزما به طريقه ميكروسكوپي بررسي شد و سپس جهت بررسي آلودگي به ويروس سياه شدن سلول ملكه، استخراج RNA و واكنش زنجيره پليمراز معكوس (RT-PCR) با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي انجام گرديد. محصولPCR الكتروفورز شده و باندهايي با طول bp 477 مشاهده شد. در اين مطالعه از 154 زنبورستان، در 70 زنبورستان 45/45 % (با فاصله اطمينان 95 درصد: برابر 53/66 % - 37/42 %) ويروس سياه شدن سلول ملكه، در 25 زنبورستان 23/16 % (با فاصله اطمينان 95 درصد: برابر 023/2 % - 10/8 %) نوزما و در 9 زنبورستان هر دو عامل ويروس سياه شدن سلول ملكه و نوزما 5/8 % (با فاصله اطمينان 95 درصد: برابر 10/8 % - 2/7 %) شناسايي شد. بنابر اين هر چند كه زنبوران كارگر مخزن مهمي براي تجمع ويروس در كلني­ هاي زنبور عسل بوده و مي­ توانند تهديدي بالقوه براي جمعيت نوزادان ملكه باشند ولي ارتباط معني­داري بين حضور نوزما و آلودگي به ويروس سياه شدن سلول ملكه در اين تحقيق مشاهده نگرديد.

Black queen cell virus (BQCV) is a viral pathogen in bees that causes significant losses in bees. The virus causes the cell wall of the queen to changes from dark brown to black. In the cells, the queen larva dies due to disease and the body fills with virus particles during pupation or pre-pupation. Sampling of 154 apiaries located in 3 provinces of the country were done in cooperation with the Veterinary Organization. About 100 adult bees were sampled from each apiary and sent to the Honey bee, Silkworm and Wildlife diseases Department of Razi Vaccine and Serum Research Institute. Samples were first examined microscopically for Nosema and then RNA extraction and reverse polymerase chain reaction (RT-PCR) were performed. The PCR product was electrophoresed and bands with a length of 477 bp were observed. Out of 154 apiaries, in 70 apiaries (45.45% and 95% confidence interval equal to 53.66% - 37.42%) queen cell blackening virus, in 25 apiaries (23.16% and 95% confidence interval equal to 23.02% - 10.8%) and in 9 apiaries, both (5.8% and 95% confidence interval equal to 10.8% - 2.7%) were identified.Thus, according to the worker bees are important reservoirs for the virus accumulates in bee colonies and can be a potential threat to the queen neonatal population, but no significant relationship was observed between the presence of Nosema and BQCV infection in this study.