جداسازي و شناسايي قارچ هاي اندوفيت توليد كننده ال- آسپاراژيناز از گياه مريم گلي باغي ( .Salvia nemorosa L)

Isolation and identification of L-asparaginase-producing endophytic fungi from Salvia nemorosa L

آنزيم ال- آسپاراژيناز تجزيه آسپاراژين را به آسپارتيك اسيد و آمونياك كاتاليز كرده و يكي از مهمترين آنزيم ها در صنايع دارويي و غذايي مي باشد. هدف از اين مطالعه، جداسازي و شناسايي قارچ هاي اندوفيت توليد كننده آنزيم آسپاراژيناز از گياه مريم گلي باغي و تعيين فعاليت اين آنزيم در اين قارچ ها مي باشد. در اين پژوهش، گونه هاي مختلف قارچ هاي اندوفيت از برگ هاي سالم گياه مريم گلي باغي جداسازي گرديد. سنجش كيفي آنزيم آسپاراژيناز روي محيط كشت آسپاراژين آگار و سنجش كمي آن در محيط كشت سيزپكس داكس به روش طيف نور سنجي با معرف نسلر انجام شد. بررسي هاي ريختي و مولكولي نشان داد جدايه ها بدست آمده به جنس هاي Alternaria، Stemphylium، Talaromyces و Linnemannia تعلق دارند. گونه هاي مختلف با ايجاد هاله صورتي تا قرمز رنگ نشان دادند قادر به توليد آنزيم آسپاراژيناز هستند. گونهAlternaria alternata با توليد U/mg 2/34 آسپاراژيناز در محيط كشت سيزپكس داكس، بهترين جدايه توليد كننده آنزيم انتخاب شد و مي تواند به عنوان يك گزينه مناسب براي توليد آنزيم مطرح باشد.

L-asparaginase is an enzyme that catalyzes the hydrolysis of asparagine into aspartic acid and ammonia and is one of the most important enzyme in the pharmaceutical and food industries. The goal of this study was the isolation and identification of asparaginase producing endophytic fungi from Salvia nemorosa and the determination of their enzyme activities. In this study, different species of endophytic fungi were isolated from healthy leaves. A qualitative assay of asparaginase enzyme was performed on asparagine agar medium and its quantitative assay was performed on Czapexdox's medium by spectroscopic method with Nessler reagent. Morphological and molecular investigations indicated that the isolates belonged to genera of Alternaria, Stemphylium, Talaromyces, and Linnemannia . Different species were shown to be able to produce the asparaginase by creating a pink to a red color zone. Alternaria alternata was selected as the best enzyme-producing, isolated by producing 2.34 U/mg asparaginase, and could be considered as a potential source for enzyme production.