عنوان مقاله :
سنجش آمينواسيدهاي آزاد در نمونه هاي خاك و كود با استفاده از كروماتوگرافي مايع با عملكرد بالا مجهز به آشكارساز فرابنفش
عنوان به زبان ديگر :
Measurement of free amino acids in soil and fertilizer samples using high performance liquid chromatography equipped with ultraviolet detector
پديد آورندگان :
احمدي عبد، بهمن دانشگاه پيام نور - گروه شيمي، تهران، ايران , هاشمي نسب، كبرا سادات سازمان تحقيقات، آموزش و ترويج كشاورزي - موسسه تحقيقات خاك و آب، كرج، ايران , پايه قدر، محمود دانشگاه پيام نور - گروه شيمي، تهران، ايران , شهبازي، كريم دانشگاه پيام نور - گروه شيمي، تهران، ايران
كليدواژه :
آمينواسيدهاي آزاد كود , فنيل ايزوتيوسيانات , خاك , كود , كروماتوگرافي مايع با عملكرد بالا مجهز به آشكارساز فرابنفش
چكيده فارسي :
در اين پژوهش غلظت آمينواسيدهاي آزاد مؤثر در متابوليسم گياهي، در نمونههاي مختلف خاك و كود به روش كروماتوگرافي مايع با عملكرد بالا مجهز به آشكارساز فرابنفش اندازه‌گيري شد. ابتدا آمينواسيدها با هيدروكلريك اسيد 1/0 نرمال استخراج شدند. سپس با فنيل ايزوتيوسيانات (PITC) مشتق‌سازي شد. در نهايت، مشتقات فنيل تيوكارباميل-آمينواسيد در ستون فاز معكوس با استفاده از شويش گرادياني با بافر سديم استات تري‌هيدرات و استونيتريل-آب (40:60 ]حجمي/حجمي[ ) جداسازي، و توسط آشكارساز UV در طول موج 254 نانومتر آشكارسازي شد. چندين پارامتر موثر بر جداسازي پيك آمينواسيدها از جمله pH و دماي فاز متحرك، غلظت بافر و اصلاح كننده (تري اتيل آمين) در فاز متحرك مورد مطالعه قرار گرفتند. با تغيير هر يك از شرايط موجود ميزان تفكيك هر يك از آمينواسيدها بهينه‌سازي شد. تحت شرايط بهينه، گستره خطي خوبي در محدوده خطي mol/mlµ 125/0 – 0312/0 براي 17 آمينواسيد با حدّ تشخيص mol/mlµ 0094/0 و تكرار پذيري قابل قبولي براي هر يك از آمينواسيدها به دست آمد (%1/6 RSD ≤). در نهايت با اين روش درصد آمينواسيدهاي آزاد در نمونههاي مختلف خاك و كود اندازه‌گيري شد.
چكيده لاتين :
In this study, the concentration of effective amino acids in plant metabolism was measured in different soil and fertilizer samples by high performance liquid chromatography. First, the amino acids of the sample were extracted with 0.1 N hydrochloric acid. Then they were derivatized with phenyl isothiocyanate (PITC). Finally, the phenylthiocarbamyl-amino acid derivatives were isolated in the reverse phase column using gradient elution with sodium acetate trihydrate and acetonitrile-water (40:60), and detected by a UV detector at 254 nm. Several parameters related to the separation of amino acid peaks, including pH and temperature of the mobile phase, buffer concentration and modifier (triethylamine) in the mobile phase were studied. By changing each of the existing conditions, the amount of resolution for amino acid peaks was optimized. Under optimal conditions, a good linear range (0.0312-0.125 µmol / ml) was obtained for 17 amino acids with a detection limit of 0.0094 µmol / ml and acceptable reproducibility for each amino acid (RSD ≤6.1%). Finally, the percentage of free amino acids was measured in different soil and fertilizer samples by this method.
عنوان نشريه :
شيمي كاربردي
