بررسي اثرات سميت سلولي و آپوپتوزيس كوركومين و تيموكينون روي رده سلولي:HUVEC يك مطالعه تجربي

CYTOTOXICITY an‎d APOPTOSIS EFFECTS OF CURCUMIN an‎d THYMOQUINONE ON HUVEC CELLS: AN EXPERIMENTAL STUDY

پيش‌زمينه و هدف: كوركومين و تيموكينون دو ماده طبيعي با اثرات جانبي كم و داراي فعاليت آنتي‌اكسيداني، ضد ديابتي و ضد سرطاني قوي و ساير خواص درماني مي‌باشند. هدف از اين مطالعه ارزيابي سميت آن‌ها روي رده سلولي HUVECs به روش MTT و فلوسايتومتري مي‌باشد. مواد و روش‌ كار: در اين مطالعه تجربي، پس از كشت سلول‌ها در پليت 96 خانه‌اي، غلظت‌هاي 5،10،20،40،80، 160،320، ميكرو مولار از ماده تيموكينون و كوركومين به سلول‌ها اضافه شده و پس از انكوباسيون در مدت‌زمان 24 و 48 ساعت با استفاده از روش MTT ميزان حيات سلول‌ها بررسي شد. و سپس ميزان القاي مرگ برنامه‌ريزي‌شده سلولي به‌وسيله دستگاه فلوسايتومتري با كيت انكسين- پروپيديوم يديد (PI-Annexin) طبق دستورالعمل كيت انجام گرفت. داده‌ها با روش آماري two way-Anova تجزيه‌وتحليل و معني‌داري در سطح p<0/05 در نظر گرفته شد. يافته‌ها: نتايج اين مطالعه نشان داد ميزان IC50 در زمان 24 ساعت براي كوركومين 35 ميكرومولار و تيموكينون 105 ميكرومولار و در زمان 48 ساعت 32 ميكرومولار براي كوركومين و 90 ميكرومولار براي تيموكينون بود (P>0.999). ميزان آپوپتوز براي كوركومين و تيموكينون به ترتيب 40 و 30 درصد تعيين گرديد. بحث و نتيجه‌گيري: در اين مطالعه مشاهده گرديد كه ميزان بقاي سلول‌ها به غلظت كوركومين و تيموكينون بستگي داشته است. اين دو تركيب باعث مرگ برنامه‌ريزي سلولي شد، و بقا سلول‌هاي تيمارشده با تيموكينون بيشتر از كوركومين است.

Background & Aims: Curcumin and thymoquinone are common herbal medicines with low side effects and potent antioxidant, anti-diabetic, and anti-cancer activity. This investigation aimed to evaluate toxicity of curcumin and thymoquinone on HUVECS cell lines via MTT and flow cytometry assays. Materials & Methods: HUVEC cells were cultured in RPMI-1640 medium under standard culture conditions (5% CO2 and 95% humidified air at 37°C). Curcumin and thymoquinone were used at concentrations of 5, 10, 20, 40, 80, 160, 320 μM and incubated for 24 and 48 hours, then cell viability was assessed using MTT assay. Cell apoptosis was measured by flow cytometry via Annexin V-FITC and propidium iodide kit. Data were analyzed using two-way ANOVA and p <0.05 was considered significant. Results: The results of this study showed that IC50 for curcumin and thymoquinone was 35μM and 105 μM at 24 h, and 32 μM and 90 μM at 48 h, respectively (p>0.999). Apoptosis rates for curcumin and thymoquinone were 40% and 30%, respectively. Conclusion: In this study, we observed that cell viability depended on the concentration of curcumin and thymoquinone. Both compounds induced apoptosis and also the cell viability of HUVEC upon treatment with thymoquinone is more than that of curcumin.