ارزيابي اثر ملاتونين بر ميزان بيان ژن‌هاي XIAP، Survivin، AKT و كاسپاز 3 در جهت افزايش حساسيت به سيس پلاتين در سلول‌هاي كشت داده شده OVCAR3

AN EVALUATION OF MELATONIN INFLUENCE ON SENSITIVITY TO CISPLATIN THROUGH EXPRESSION OF SURVIVIN, XIAP, CASPASE-3, an‎d AKT GENES IN OVCAR3 OVARIAN CANCER CELLS

پيش‌زمينه و هدف: سرطان تخمدان هفتمين سرطان شايع و پنجمين دليل شايع مرگ‌و‌مير بين زنان دنيا است. بنابراين، يافتن داروهاي جديد كه باعث افزايش كارايي داروهاي شيمي‌درماني شود و امكان استفاده از آن در دوزهاي پايين‌تر، كه منجر به كاهش عوارض جانبي گردد ضروري است. هدف از اين مطالعه ارزيابي كردن اثر ملاتونين بر ميزان بيان ژن‌هاي XIAP، Survivin، AKT و كاسپاز 3 در جهت افزايش حساسيت به سيس پلاتين در سلول‌هاي كشت داده شده OVCAR3 بود. مواد و روش‌ كار: در اين مطالعه سلول‌هاي OVCAR3 با غلظت‌هاي مختلف ملاتونين (10، 5، 2/5، 1/25، 0/625،30/312، 0/001) ميكرومولار و غلظت‌هاي مختلف سيس پلاتين (15، 7/5، 3/75، 1/875، 0/937، 0/001) ميكرومولار در زمان‌هاي كشت 24 و 48 و 72 ساعت كشت داده شد. سپس سميت سلولي با تست MTT موردبررسي قرار گرفت. تست Real time PCR براي ارزيابي سطح نسبي بيان ژن‌هاي XIAP، Survivin، AKT و كاسپاز 3 در گروه‌هاي كنترل، ملاتونين، سيس پلاتين و تركيبي ملاتونين و سيس پلاتين اجرا شد. يافته‌ها: نتايج اين مطالعه نشان داد كه ملاتونين تكثير سلول‌هاي سرطاني كشت يافته OVCAR3 را بر اساس يك مكانيسم وابسته به دوز و زمان مهار مي‌كند. نتايج حاصل از آناليز داده‌ها نشان داد كه در گروه‌هاي ملاتونين و تركيبي ملاتونين-سيس پلاتين افزايش معني‌داري در سطح بيان ژن كاسپاز 3 مشاهده مي‌شود. همچنين بيان ژن مهاركننده آپوپتوز Survivin در گروه تركيبي ملاتونين-سيس پلاتين كاهش (اختلاف مرزي) يافت. درحالي‌كه در گروه‌هاي تست‌شده سطح بيان نسبي ژن‌هاي Xiap و Akt تغييرات معني‌داري نداشت. بحث و نتيجه‌گيري: يافته‌هاي اين مطالعه نشان مي‌دهد با مصرف ملاتونين سلول‌هاي OVCAR3 به سيس پلاتين حساسيت بيشتري پيدا مي‌كنند. آن مي‌تواند براي مديريت بيماران مبتلا به سرطان تخمدان به كار رود.

Background & Aims: Ovarian cancer is the seventh most common cancer and the fifth most common cause of death among women worldwide. Therefore, it is necessary to find new drugs that increase the effectiveness of chemotherapy drugs and the possibility of using them in lower doses, which leads to a reduction in side effects. The aim of this study was to evaluate the effect of melatonin on the expression of XIAP, Survivin, AKT, and caspase 3 genes in order to increase cisplatin sensitivity in cultured OVCAR3 cells. Materials & Methods: In this study, OVCAR3 cells with different concentrations of melatonin (0.001, 0.312, 0.625, 1.25, 2.5, 5,10 μM) and different concentrations of cisplatin (0.001, 0.937, 1.875, 3.75, 7.5, 15 μM) were cultivated at 24, 48, and 72 hours. Then, cytotoxicity was assessed by MTT assay. Real-time PCR test was performed to evaluate the relative gene expression level of XIAP, Survivin, AKT, and caspase 3 genes in control, melatonin, cisplatin, and a combination of melatonin and cisplatin groups. Results: The results of this study showed that melatonin inhibits the proliferation of cultured OVCAR3 cells based on a dose and time-dependent mechanism. The results of analysis showed that there is a significant increase in the gene expression level of caspase 3 regarding melatonin and melatonincisplatin groups. Also, the expression of Survivin apoptosis inhibitor gene in melatonin-cisplatin combination group decreased (borderline difference). There were no significant changes in tested groups regarding relative gene expression of Xiap and Akt. Conclusion: The findings of this study show that OVCAR3 cells became more sensitive to cisplatin in the presence of melatonin. It can be used to manage patients with ovarian cancer.