تأثير تنش فراصوت بر مقدار فنل كل و فعاليت آنتي‌اكسيداني در برگ و كالوس گياه Securigera securidaca L

The effect of ultrasonic stress on the amount of total phenolic content and antioxidant activity in the Securigera Securidaca L. leaves and callus

تنش‌هاي غير زيستي و كالوس‌زايي مي‌توانند سبب افزايش تركيبات فنلي شوند. هدف از اين پژوهش افزايش مقدار فنل‌كل و فعاليت آنتي‌اكسيداني در گياه دارويي عدس‌الملك (Securigera securidaca) و كالوس‌هاي حاصل از آن به‌وسيله تنش فراصوت، در شرايط درون آزمايشگاهي بود. گياهان در گلخانه رشد كردند. كالوس‌زايي با محيط كشت MS حاوي 2/2 ميلي‌گرم بر ليتر آلفا نفتاليك استيك اسيد و 8/8 ميلي‌گرم از 6-بنزيل آمينو پورين انجام شد. تنش فراصوت بر روي گياه اصلي به‌مدت 10، 20 و 30 دقيقه و در طي 15 روز، در شرايط درون آزمايشگاهي اعمال شد. تنش فراصوت بر روي كالوس به‌مدت 10 دقيقه و به‌مدت 15 روز صورت گرفت. نمونه‌ها در روزهاي گوناگون (روز اول، پنجم، دهم و پانزدهم) جمع‌آوري شدند. سپس نمونه‌ها در آون خشك و عصاره اتانولي از آن‌ها تهيه شد. آزمون‌هاي تعيين مقدار فنل‌كل و فعاليت آنتي‌اكسيداني به‌وسيله روش‌هاي Folin-Ciocalteu و Wu بر روي برگ‌هاي گياه اصلي و كالوس آن انجام شد. نتايج نشان دادند بيشترين مقدار فنل كل در گياه در تنش فراصوت، در روز اول و تيمار 30 دقيقه بود. در تمامي تيمارها، فعاليت آنتي‌اكسيداني نسبت به نمونه شاهد كاهش يافته بود. بيشترين مقدار فنل‌كل در كالوس‌هاي در تيمار تنش فراصوت، در روز پانزدهم مشاهده شد. فعاليت آنتي‌اكسيداني در كالوس‌هاي در تنش فراصوت نسبت به نمونه كنترل كاهش يافت؛ بنابراين مي‌توان نتيجه گرفت كه تنش فراصوت در نمونه‌هاي اين آزمايش سبب افزايش مقدار فنل‌كل شد اما بر فعاليت آنتي‌اكسيداني تأثيري نداشت. همچنين كالوس‌زايي و تنش فراصوت به‌طور هم‌زمان سبب افزايش مقدار فنل‌كل مي‌گردد.

Abiotic stress and callus formation can increase total phenolic content and antioxidant activity. The aim of this study was to increase the amount of total phenol and antioxidant activity in Securigera securidaca L. and its calli by ultrasonic stress in vitro conditions. The plants were grown in the greenhouse. Callus formation was performed with MS culture medium containing α-naphthalene acetic acid (2.2 mg/L) and 6-Benzylaminopurine (8.8 mg/L). Ultrasonic stress was applied to the main plants for 10, 20 and 30 minutes in 15 days in vitro conditions; in addition, the ultrasonic stress was applied to the calli for 10 minutes at the same time. The samples were collected on the first, fifth, tenth and fifteenth days. The samples were then dried in an oven, then their ethanolic extract was prepared. Total phenol content and antioxidant activity tests were performed by Folin-Ciocalteu and Wu methods respectively on the leaves of the main plant and its calli. The results showed that the amount of total phenol in the 30 minutes on the first day of ultrasonic treatment is higher than the control. In all treatments, antioxidant activity was reduced compared to the control sample. The highest amount of phenol was observed in calli in ultrasonic stress treatment on the 15th day. Antioxidant activity was reduced in calli under ultrasonic stress compared to the control sample. Therefore, it can be concluded that ultrasonic stress in the samples of this experiment increased the amount of phenolic but did not affect the antioxidant activity. Callus formation and ultrasonic stress also increase total phenol content simultaneously.