تاثير سيكلوفسفاميد بر ميزان بيان miRNA-15a در سلول B ترانسفورم شده با ويروس اپشتاين بار

Effect of Cyclophosphamide on miRNA-15a expression in EBV infected transformed B cell

مقدمه: ‌با وجود پيشرفت در تشخيص و درمان، سرطان يكي از عوامل مهم مرگ و مير در دنياست. سيكلوفسفاميد به عنوان يكي از داروهاي مهم در درمان سرطان مي باشد. با اين حال، هنوز اثرات ضد لنفوماي سيكلوفسفاميد به ويژه در لنفوم هاي سلول B بر روي بيان miRNAها مشخص نيست. هدف از مطالعه حاضر، بررسي اثر سيكلوفسفاميد بر روي سايتوتوكسيسيتي و بيان miRNA-15a در لنفوم سلولB آلوده به ويروس اپشتاين بار ويروس (EBV) بود. مواد و روش ها: در اين مطالعه ، تاثير سيكلوفسفاميد بر رده سلولي CO 88BV59-1 LCL كه نوعي سلولB آلوده به ويروس EBV مي باشد، مورد بررسي قرار گرفت. سلولها به مدت 3 روز با سيكلوفسفاميد (05/0 تا 50 ميكرو مول) تحت درمان قرار گرفتند. ميزان زنده ماني سلول و مرگ سلولي به ترتيب با استفاده از تكنيك MTT و فلوسيتومتري مورد بررسي قرار گرفتند. همچنين، بيان miRNA-15a3p و miRNA-15a5p توسط Real-Time PCR تعيين شد. نتايج:‌ سيكلوفسفاميد به طور قابل توجهي باعث مهار تكثير و آپوپتوز در سلولهاي آلوده به EBV به صورت وابسته به دوز و زمان شد(P<0.05). در سلول هاي تيمار شده با سيكلوفسفاميد تغيير معني داري در ميزان بيان miRNA-15a3p و miRNA-15a5p در مقايسه با سلول هاي تيمار نشده وجود نداشت(P>0.05). نتيجه گيري:‌ نتايج نشان داد كه تاثير سايتوتوكسيسيتي سيكلوفسفاميد در كاهش زنده ماني و افزايش مرگ سلولي سلول هاي B ((CO 88BV59-1 LCL مستقل از تاثير بر روي ميزان بيان miRNA-15a3p و miRNA-15a5p مي باشد.

Background: Despite advances in diagnosis and therapy of cancer, it is still the main cause of death worldwide. Cyclophosphamide is one of the major drugs for lymphoma treatment. However, the anti-lymphoma effects of cyclophosphamide on micro-RNA expression are still unclear, especially in B cell lymphomas. The aim of the present study was to evaluate the effect of cyclophosphamide on miRNA-15a genes expression in Epstein‐Barr‐Virus (EBV)-infected transformed B cell. Material and Methods: In this study, the effects of cyclophosphamide on CO 88BV59-1 LCL – an EBV infected transformed B cell was evaluated. The cells were treated with cyclophosphamide (0.05-50 µM), for 3 days. The cell viability and cytotoxicity were evaluated using MTT, and flow cytometry techniques, respectively. Also, miRNA-15a genes expression were determined by real-time PCR. Results: Cyclophosphamide significantly inhibited proliferation and induced cell death in the cell-line in a dose and time-dependent manner (P<0.05). There were no significant changes in the expression of miRNA-15a3p and miRNA-15a5p in treated cells compared to untreated cells (P>0.05). Conclusions: The results showed that cytotoxic effects of cyclophosphamide on CO 88BV59-1 LCL is not related to miRNA-15a3p and miRNA-15a5p expressions.