عدم تاثير پلاسماي رت هاي پيش شرطي شده، ايسكمي شده و ايسكمي-خونرساني مجدد شده ميوكاردي بر تمايز سلولهاي بنيادي مزانشيمي به كارديوميوسيت

Lack of effect of plasma of myocardial preconditioned, ischemic and ischemic-reperfused rats of myocardium on differentiation of mesenchymal stem cells into cardiomyocytes

مقدمه: مطالعات متعدد نشان داده اند كه پلاسماي غني شده سبب محافظت سلول هاي ميوكاردي در برابر ايسكمي مي شود. در اين مطالعه اثر پلاسماي غني شده رتهاي پيش شرطي شده، ايسكمي شده و خونرساني مجدد شده ميوكاردي بر تمايز سلولهاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان (bone marrow mesenchymal stem cells, BMMSC ) به كارديوميوسيتها مورد ارزيابي قرار گرفت. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي - آزمايشگاهي BMMSCها از استخوان فمور رتهاي نر بالغ نژاد ويستار با محدوده وزني 300250 گرم استخراج گرديد. BMMSCهاي پاساژ سوم به شش گروه تقسيم شدند: گروه 1) كنترل، گروه 2) آزاسايتيدين، گروه 3) دريافت كننده آزاسايتيدين و پلاسماي غير ايسكمي، گروه 4) دريافت كننده آزاسايتيدين و پلاسماي پيش شرطي شده، گروه 5) دريافت كننده آزاسايتيدين و پلاسماي ايسكمي شده، گروه 6) دريافت كننده آزاسايتيدين و پلاسماي خونرساني مجدد شده. در تمام گروه به جز گروه 1، يك دوز آزاسايتيدين (10 ميكرومول) براي يكبار به مدت 24 ساعت اضافه شد تا تمايز به كارديوميوسيتها را شروع نمايد. هر زمان كه محيط كشت تعويض مي شد، پلاسما ( g/ml 25) نيز به محيط كشت اضافه مي شد. در نهايت، ميزان بيان ژن هاي BMHC، دسمين و تروپونين كميوكاردي با استفاده از روش QRT-PCR مورد ارزيابي قرار گرفت. نتايج: بيان ژنهاي 3MHC، دسمين و تروپوئين | ميوكاردي در تمام گروه هاي دريافت كننده آزاسايتيدين (2 تا 6) به طور معناداري افزايش يافت ( 0.01>P). تفاوت معناداري در بيان ژنهاي 2MHC، دسمين و تروپونين I ميوكاردي و همچنين زمان دابلينگ تايم و مهاجرت بين گروههاي دريافت كننده پلاسما (3 تا6) با گروه 2 يعني آزاسايتيدين به تنهايي وجود نداشت ( 0.05

Introduction: Numerous studies have shown that enriched plasma protects myocardial cells against ischemia. The aim of this study was to evaluate the effect of rat enriched plasma by preconditioning, ischemia, and reperfusion on the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) into cardiomyocytes. Methods: In this experimental and laboratory study, BMMSCs were extracted from the femur bone of male Wistar rats weighting 250-300 g. BMMSCs of the third passage were divided into six groups according to the type of plasma received: 1) control, 2) azacytidine, 3) azacytidine and non-ischemic plasma recipient, 4) azacytidine and preconditioned plasma recipient , 5) azacytidine and ischemic plasma recipient 6) azacytidine and plasma reperfusion recipient groups. In all groups except group 1, to initiate cardiomyocyte differentiation, BMMSCs were exposed to azacytidine (10 μM) for 24 hours. Plasma (25 μg / ml) was added to the culture medium each time the culture medium was changed. After 21 days, the expression level of myocardial βMHC, desmin, and troponin I genes was assessed using qRT-PCR. Results: The expression of myocardial βMHC, desmin, and troponin I genes was significantly increased in all groups received azacytidine (groups 2 to 6) (P<0.01). There was no significant difference in the expression of myocardial βMHC, desmin, and troponin I genes, the doubling time, and migration between the plasma receiving groups (groups 3 to 6) compared to the group 2 (P>0.05). Conclusion: The findings of present study showed that the plasma collected during ischemia, ischemia-reperfusion, and ischemia preconditioning had no effect on the differentiation of BMMSCs into cardiomyocytes in the presence of azacytidine.