طراحي يك روش الايزاي غيرمستقيم جهت غربالگري اسب‌ها بر اساس توانمندي توليد آنتي ونوم اختصاصي عليه كفچه مار ايراني

در اين مطالعه يك روش الايزاي غيرمستقيم طراحي گرديد تا تيتر آنتي‌بادي توليد شده در برابر سم مار كبري پس از هر مرحله تزريق اسب مورد سنجش قرار گيرد. به منظور ايمن‌سازي اسب‌ها از فراكسيون‌هاي سمي زهر مار ناجا ناجا اكسيانا به عنوان آنتي‌ژن استفاده شد. اين روش امكان آن را فراهم مي‌كند كه بتوان افزايش مقدار آنتي‌بادي در پاسخ به تزريق سم را مورد بررسي قرار داد و از اين طريق كارايي فرآيند ايمن‌سازي را ارزيابي كرد. به منظور طراحي الايزاي غيرمستقيم، رقت‌هاي 1.50، 1.500 و 1.1000 از سرم كنترل مثبت و سرم كنترل منفي برعليه غلظت‌هاي 0.5، 1 و µg/well 2 از سم استفاده شد.  غلظت µg/well 2 از سم و رقت 1:1000 از سرم براي ارزيابي آنتي ونوم انتخاب گرديد. پس از راه‌اندازي سيستم الايزا، سرم‌هاي حاصل از خونگيري اسب‌ها مرحله به مرحله پس از تزريق سم مورد آزمايش قرار گرفت تا روند افزايش تيتر آنتي ونوم مورد ارزيابي قرار گيرد. ميانگين جذب نوري سرم‌ها پس از تزريق سوم 1.213 بود؛ اين مقدار 5.8 برابر ميانگين جذب نوري نمونه‌ها پس از مرحله اول ايمن‌سازي است. تمامي اسب‌ها پس از تزريق پنجم به تيتر مناسبي از آنتي ونوم رسيدند. نتايج بدست آمده نشان داد كه الايزاي طراحي شده مي‌تواند براي سنجش مقدار آنتي ونوم سرمي اسب‌ها به ويژه در ابتداي ايمن‌سازي مورد استفاده قرار گيرد.