تأثير عصاره پروتئيني بذور چند گياه بر فعاليت آنزيم آلفا آميلاز و ويژگي‌هاي زيستي كرم غوزه پنبه

Effect of some plant seeds protein extract on α-amylase activity and some biological parameters of cotton bollworm

در پژوهش پيش رو، اثر عصاره پروتئيني بذر اقاقيا (Robinia pseudoacacia)، ماشك خوشه­اي (Vica villosa)، يونجه (Medicago sativa) و عدس (Lens culinaris) در شرايط آزمايشگاهي به‌صورت برون تني و درون تني روي فعاليت آنزيم آلفا آميلاز و طول دوره لاروي كرم غوزه پنبه، Helicoverpa armigera (Hübner)، بررسي­شد. چهار غلظت (14، 15/13، 05/10 و 7/9 ميكروگرم) از عصاره پروتئيني بذر اقاقيا، ماشك خوشه­اي، يونجه و عدس، عصاره اقاقيا در مقايسه با ديگر عصاره‌هاي پروتئيني بيشترين اثر مهاركنندگي را نشان داد. بالاترين مهاركنندگي آنزيم تحت تاثير هر چهار مهاركننده در pH برابر 9 مشاهده شد.آناليز زايموگرام در تأييد سنجش كمي آنزيم، مهار آنزيم آلفا-آميلاز را در كاهش ضخامت باند نشان داد. در بالاترين غلظت از عصاره پروتئيني بذر يونجه، 49% مهار آنزيم مشاهده شد. در حضور مهاركننده اقاقيا در غلظت 41 ميكروگرم بر ميلي ليتر، 76% فعاليت آنزيم آلفا آميلاز كاهش يافت. آنزيم آلفا آميلاز با غلظت­هاي مختلف عصاره پروتئيني عدس سنجش شد و يك روند مهاركنندگي وابسته به غلظت به دست آمد در بالاترين غلظت، 51% مهار آنزيم مشاهده ­شد. همچنين چهار غلظت مختلف مهاركننده ماشك گل­خوشه­اي هم با عصاره آنزيمي سنجش شد و در بالاترين غلظت ماشك گل خوشه­اي، 61% درصد مهار آنزيم مشاهده شد. نتايج به دست­آمده نشان داد كه فعاليت آنزيم آميلاز از سن دو به بعد و پس از تغذيه از تيمار اقاقيا نسبت به ساير تيمارها كاهش معني­داري داشت. همچنين طول دوره لاروي در تيمار اقاقيا (12/1±03/49 روز) در مقايسه با ديگر تيمارها به طور معني‌داري طولاني­تر بود. مطالعات مهاركنندگي نشان داد كه عصاره پروتئيني بذر اقاقيا توان مهاركنندگي خوبي براي آنزيم آميلاز اين آفت داشت.

In the present study, effect of seed protein extracts of Robinia pseudoacacia, Medicago sativa, Lens culinaris and Vica villosa were studied (in vitro and in vivo) on alpha-amylase activity of boll worm, Helicoverpa armigera (Hübner). Effect of 4 concentrations (14, 13.15, 10.05 and 9.7 μg) of protein extract of the mentioned plants showed the greatest inhibitory effect. The highest inhibition of the enzyme was observed under the influence of all four inhibitors at pH value equal to 9. Zymogram analysis in confirmation of enzyme quantification showed inhibition of alpha-amylase in reducing band thickness. At the highest concentration of alfalfa seed protein extract, 49% enzyme inhibition was observed. In the presence of acacia inhibitor at a concentration of 41 μg / ml, 76% of alpha-amylase activity was reduced. Alpha-amylase was assayed at different concentrations of lentil protein extract and a concentration-dependent inhibitory process was obtained at the highest concentration of 51% enzyme inhibition. Also, four different concentrations of hairy vetch inhibitor were measured with enzymatic extract and in the highest concentration of hairy vetch, 61% of enzyme inhibition was observed. Amylase activity in digestive lumen after the second larval instar in acacia treatment showed significant reduction. Total larval longevity in acacia treatment (49.03±1.12) had significantly longer life time in comparison with other treatments. Thus, the seed extract of R. pseudoacacia had high inhibitory activity for the α-amylase of this pest.