تاثير بيان هم زمان چپرون هاي سيتوپلاسمي بر بيان فاكتور رشد عصبي نوتركيب در ميزبان بياني E. coli

فاكتور رشد عصبي (NGF) يك فاكتور نوروتروفيك عصبي مي باشد كه در حفظ، بقاء و تمايز سلول هاي عصبي مركزي و محيطي فعاليت دارد. اين پروتئين سه زيرواحدي بوده كه زيرواحد بتاي آن داراي فعاليت اصلي است. براساس تحقيقات، به نظر مي رسد كه مي توان از اين فاكتور در درمان بسياري از بيماري ها از جمله نوروپاتي هاي محيطي در ارتباط با ديابت، آلزايمر، پاركينسون، بيماري هاي پوستي و غيره استفاده كرد. به دليل فضاي اكسيداتيو پري پلاسم، بيان پروتئين نوتركيب NGF در ميزبان پروكاريوتي بايد در پري پلاسم صورت گيرد. شايان ذكر است كه بيان هم زمان چپرون هاي سيتوپلاسمي، مي تواند ترشح پروتئين هاي نوتركيب به فضاي پري پلاسمي را تسهيل كرده و سبب افزايش حلاليت آن ها شود. در اين تحقيق تاثير چپرون هاي سيتوپلاسمي GroEL/GroES، DnaK/DnaJ،GrpE ، Trigger Factor(TF) بر ميزان توليد پري پلاسمي پروتئين نوتركيب NGF مطالعه گرديد. بدين منظور زيرواحد beta;NGF در وكتور بياني pET39b(+) بصورت هم زمان با پلاسميدهاي چپروني pGTf2، pTf16، pGro7،pKJE7 و pGKJE8 در باكتري E. coli سويه DE3 بيان شد. نتايج بدست آمده نشان دادند كه در حضور چپرون ) TFپلاسميد چپروني pTf16 ) توليد كل محتواي پروتئيني و پروتئين هاي پري پلاسمي افزايش داشته است. همچنين مجموع چپرون هاي DnaK/DnaJ و GroEL/GroES(پلاسميد چپروني pGKJE8 ) نيز تا حدودي سبب افزايش توليد شده اند، در حالي كه بيان هر يك از چپرون هاي GroEL/GroES(پلاسميد چپروني pGro7) و يا DnaK/DnaJ (پلاسميد چپرونيpKJE7) تأثيري بر بيان پروتئين نداشته اند. نتايج كشت سلول نيز نشان دهنده فعال بودن پروتئين توليدي بوده و تمايز سلول ها به سلول هاي عصبي را نشان مي دهد.