عنوان مقاله :
معرفي يك روش بهينه تخليص DNA ژنومي توكسوپلاسما گوندي از مغز موش صحرايي جهت افزايش كارايي تشخيص عفونت توكسوپلاسما
پديد آورندگان :
ياسمي خياباني ، ستايش انستيتو پاستور ايران - گروه انگل شناسي , چوپاني ، سميرا انستيتو پاستور ايران - گروه فيزيولوژي و فارماكولوژي , بابايي ، جلال انستيتو پاستور ايران - گروه انگل شناسي , گل كار ، مجيد انستيتو پاستور ايران - گروه انگل شناسي , سياح ، محمد انستيتو پاستور ايران - گروه فيزيولوژي و فارماكولوژي
كليدواژه :
تخليص DNA , واكنش كمي زنجيره اي پليمراز , RFP-529
چكيده فارسي :
زمينه و هدف: استخراج DNA ژنومي توكسوپلاسما گوندي از مغز موش صحرايي به دليل ميزان ناچيز آلودگي و چربي زياد مغز چالش برانگيز است. واكنش كمي زنجيره اي پليمراز در زمان واقعي (RT-qPCR) عليرغم تشخيص مقادير ناچيز ژن هنوز با نتايج منفي-كاذب همراه است. ما با تغيير روش استخراج DNA از بافت مغز موش توانستيم تعداد موارد منفي-كاذب آلودگي به توكسوپلاسما گوندي را كاهش دهيم. روش ها: از مغز يازده موش (نر ويستار) آلوده به سوش تهران انگل توكسوپلاسما (در هفته هشتم آلودگي ) و سه موش غيرآلوده استفاده شد. جهت تخليص DNA بجاي 20 ميلي گرم مغز (روش معمولي) كل مغز استفاده شد. ميزان آنزيم پروتئيناز كا دو برابر و مدت انكوباسيون شش برابر روش معمول شد. سپس ميزان DNA نمونه ها با روش RT-qPCR اندازه گيري شد. يافته ها و نتيجه گيري: با روش رايج از يازده موش آلوده فقط سه موش مثبت شدند در حالي كه با بهينه سازي تخليص DNA، نه موش مثبت تشخيص داده شدند.
عنوان نشريه :
مجله فيزيولوژي و فارماكولوژي ايران
عنوان نشريه :
مجله فيزيولوژي و فارماكولوژي ايران
