بررسي اثرات درماني حذف lncRNA NEAT1 و القاي آپوپتوز در رده سلولي سرطان پروستات با استفاده از CRISPR/Cas9

سابقه و هدف: lncRNA (Long non-coding ribonucleic acid) به عنوان كنترل‌كننده اساسي ژن‌ها و ماركرهاي پيش‌آگهي در سرطان‌هاي مختلف شناسايي شده‌ است. در اين مطالعه، اثر تخريب NEAT1 lncRNA (Nuclear Paraspeckle Assembly Transcript 1) با استفاده از سيستم CRISPR/Cas9 (Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/ CRISPR associated protein 9) در رده سلولي PC3 مورد بررسي قرار گرفت. مواد و روش‌‌ها: در اين مطالعه تجربي، پلاسميدهاي نوتركيب حامل sgRNA (Single guide RNA) در سيستم CRISPR طراحي و ساخته شدند. سلول‌هاي رده سرطان پروستات PC3 با وكتورهاي نوتركيب، ترانسفكت شده و ميزان بيان ژن‌هاي مرتبط با آپوپتوز با استفاده از روش qPCR (Quantitative polymerase chain reaction) سنجيده شد. از آزمون‌هاي انكسين، MTT و خراش سلولي به ترتيب براي بررسي فعاليت‌هاي آپوپتوزي، زيستايي و تكثير سلولي و مهاجرت سلولي استفاده گرديد. يافته‌ها: تخريب ژن NEAT1 با روش CRISPR/Cas9 سبب تغييرات محسوس در بيان ژن‌هاي مرتبط با آپوپتوز گرديد؛ به طوري كه بيان ژن‌هاي P21، BCL2 و BIRC5 كاهش يافت و بيان P53 و BAX افزايش پيدا كرد. علاوه‌براين در سلول‌هاي گروه تيمار، ميزان تكثير و مهاجرت سلولي نسبت به گروه كنترل كاسته شد. افزايش آپوپتوز در سلول‌هاي ويرايش ژن شده نسبت به گروه كنترل مشاهده گرديد. نتيجه‌گيري: NEAT1 به عنوان يك انكوژن، نقش مهمي در تومورزايي دارد و تخريب آن سبب كاهش بقا و مهاجرت سلولي و نيز افزايش آپوپتوز سلول‌هاي سرطاني مي‌شود.